70
bilan bilvosita o`lchanadi. Fermentlar miqdorini bevosita to`g`ridan-to`g`ri
aniqlash faqat gomogen, ya`ni kristall fermentlardagina bo`lishi mumkin.
Vaqt birligi ichida substratning kamayishi yoki reaktsiya mahsulotining
o`sish tezligi ferment faolligi deb aytiladi.
Ferment faolligini aniqlash uchun standart sharoitlar.
Ferment faolligini to`g`ri aniqlashga har bir
ferment uchun belgilangan
muayyan sharoitda va ma`lum bir vaqt oralig`ida subtrat miqdorining yoki
reaktsiya mahsuloti miqdorining o`zgarishini aniq o`lchash kerak bo`ladi:
-
aniqlanadigan ferment uchun optimal pH qiymatini nazorat qilish
(mos keladigan buferdan foydalaniladi);
-
substrat miqdori to`yinish darajasidan ortiqroq bo`lishi kerak, bunday
sharoitda reaktsiyaning maksimal tezligini ushlab turishga
erishish mumkin;
-
kofaktorlar talab etadigan murakkab fermentlar (metall ionlari,
kofermentlar) uchun ham kofaktorlar miqdori to`yinish darajasidan yuqori bo`lishi
kerak;
-
standart harorat 25° C bo`lishi kerak;
Bunday standart sharoitlar reaktsiyaning 0 ga teng ekanligini ta`minlaydi va
bunda substrat yoki reaktsiya mahsuloti miqdorining o`zgarishi faqatgina muhitga
qo`shiladigan ferment miqdoriga bog`liq bo`ladi.
Ferment faolligini to`g`ri o`lchash uchun reaktsiyaning boshlang`ich
tezligini aniqlash kerak, chunki vaqt o`tishi bilan reaktsiyani tormozlovchi
mahsulotlarning hosil bo`lishi yoki qaytalama reaktsiya sur`atining
sezilarli
darajada borishi natijasida fermentativ reaktsiyaning tezligi ancha pasayadi.
Substrat yoki reaktsiya mahsuloti miqdorini aniqlash usullari. Bunday
aniqlash uchun ma`lum bir vaqt o`tgandan so`ng reaktsiya to`xtatilib yoki
reaktsiya borishi davomida qayd qilinib,
kolorimetrik, spektrofotometrik,
fluorimetrik, polyarografik usullarda olib boriladi.
Ferment faolligi birliklari. Ko`pincha fermentlarning miqdori mutlaq
kattaliklar, masalan mg larda yoki fermentlarning mollarida o`lchash
mumkin
bo`lmaganligi uchun shartli ferment birliklarida ifodalanadi. Halqaro bioximiklar
ittifoqining “Fermentlar nomenklaturasi” kitobida fermentlarning struktura birligi
(ME) deb substratning 1 mikromolini bir minutdagi (standart sharoitda)
o`zgarishini katalizlovchi miqdori qabul qilingan edi. Lekin,
ME SI sistemasiga
ko`ra nomlana olmaydi, chunki minut bu sistemada qabul qilingan emas. 1972 yil
bioximiyaviy nomenklatura komissiyasi katal nomi bilan boshqa birlikni qabul
qiladi. Katal (ramzi- kat) reaktsiyaning 1 sekundda 1 molga teng sur`at bilan bajara
oladigan katalitik faolligini ifodalaydi. Binobarin, 1 katalga teng faollik 1 mol./sek
dir. U juda yuqori kattalik bo`lganligidan amaliy tadbiq uchun mikrokatal (mk kat),
nanokatal (nkat) qo`llaniladi. Bu kattaliklar 1 sekundda mikromol, nanomollarga
to`g`ri keladi. Qondagi fermentlarning faolligi SI sistemasiga
muvofiq kattaliklarda
ifodalanadi.
Fermentning solishtirma faolligi 1 mg dagi birliklar soni standart
sharoitlarda 1 mikromol substratni 1 minutda o`zgartirish qobiliyatiga ega bo`lgan
ferment massasiga teng hamda mkmol/(min H mg oqsil) da ifodalanadi.