И правила работы в лаборатории биохимии

Порядок работы на рН-метре: 
1. Включить электропитание прибора. 
2. Перевести прибор в режим вывода данных в единицах рН 
(по умолчанию они обычно выводятся в милливольтах). 
3. Поднять электроды из стаканчика с водой. 
4. Вытереть аккуратно электроды фильтровальной бумагой. 
5. Опустить электроды в стаканчик с исследуемым раствором 
так, чтобы они находились вблизи дна, но не касались его.
6. Подождать, когда показания прибора станут постоянными, 
и записать их.
7. Поднять электроды из раствора и протереть их фильтро-
вальной бумагой. 
8. Опустить электроды в стаканчик с дистиллированной водой 
для их промывания. 
9. Поднять электроды, сменить воду в стаканчике на чистую
и оставить электроды в воде. 
10. Выключить электропитание прибора. 
рН-метрия – точный метод определения кислотности, но он
не позволяет определить истинную концентрацию кислоты или ще-
лочи в растворе. 
3.2.4. Кислотно-основное титрование 
Титрование – объемный метод количественного анализа, осно-
ванный на стехиометрическом взаимодействии добавляемого по кап-
лям из бюретки раствора реагента точной концентрации (титранта),
с определяемым веществом. Полноту вступления определяемого 
вещества в реакцию определяют обычно по изменению окраски 
вводимого в реакционную смесь индикатора. 
Кислотно-основное титрование представляет собой взаимо-
действие определяемых веществ, обладающих кислотно-основными 
свойствами, с растворами сильных кислот и оснований, таких как 
серная или соляная кислоты, гидроксиды калия и натрия. Слабые 
электролиты никогда не используются для приготовления титрантов. 
В ходе титрования рН раствора постепенно меняется. До тех 
пор, пока во взаимодействие не вступят 90 % определяемого 
вещества, это изменение происходит сравнительно плавно. Когда 
происходит оттитровывание от 90 до 99 % определяемого вещества, 

---

27 
изменение рН происходит более резко. В процессе взаимодействия
с титрантом последнего 1 % определяемого основания или кислоты 
происходит очень резкий скачок кислотности, которая после дости-
жения точки эквивалентности (это момент, когда 100 % опреде-
ляемого вещества прореагирует с титрантом) уже будет определяться 
избытком добавленного титранта. Такая зависимость графически 
описывается кривыми титрования – графиками зависимости рН 
реакционной смеси от объема добавленного титранта. Интервал 
перехода окраски индикатора, используемого в конкретной методике 
титриметрического анализа, должен примерно совпадать с рН в точке 
эквивалентности. В биохимии чаще всего встречается титрование 
слабой кислоты сильным основанием. Кривая титрования уксусной 
кислоты раствором гидроксида натрия с концентрацией 0,1 моль/л
показана на рис. 3. 
При таком титровании, как правило, в качестве индикатора 
используют фенолфталеин. При титровании сильной кислотой 
сильного основания или слабой кислотой слабого основания чаще 
используется метиловый красный, для титрования слабого основания 
сильной кислотой – индикатор метилоранж.
Рис. 3. Кривая титрования уксусной кислоты 0,1 М раствором
гидроксида натрия 
 
Титрование делится на прямое и обратное. При прямом 
титровании титрант непосредственно взаимодействует с определя-

---

28 
емым веществом. При обратном титровании к определяемому ве-
ществу добавляют избыток первого титранта, который взаимо-
действует с ним, а затем оттитровывается непрореагировавший 
остаток первого титранта вторым титрантом. Обратное титрование 
применяют в тех случаях, когда определяемое вещество вступает
в реакцию слишком медленно и прямое титрование невозможно.