И правила работы в лаборатории биохимии

разделении зависят от значения рН и ионной силы среды. Кроме того, 
скорость движения определяется молекулярной массой молекул, 
ионным окружением (составом и концентрацией буфера), приложен-
ным напряжением и другими факторами. В связи с этим для полу-
чения сопоставимых данных электрофорез должен осуществлять- 
ся при строго определенных значениях указанных параметров. 
Например, в буферном растворе с рН = 8,6 или 8,9 и ионной силой 
0,08–0,15 моль/л белки сыворотки крови приобретают отрицательный 
заряд и движутся от катода к аноду, причем дальше всего уходят 
альбумины, имеющие меньшую молекулярную массу, затем распо-
лагаются a
1
-, a
2
-, b- и g-глобулины. Результаты электрофореза зави- 
сят от подготовки пробы и мастерства персонала лаборатории,
а качество «картинки» – от навыков исследователя в проведении 
анализа. 

---

42 
Аппараты для электрофореза 
 
Для электрофореза используются различные аппараты – как 
ручные, так и полуавтоматические. Современные комплексы осна-
щены микропроцессорными блоками питания и управляются 
компьютером; в большинстве систем на последней стадии исследо-
вания окрашенных мембран или гелевых пластинок (определения 
относительного количества белков в каждой фракции) используется 
электронный цветной сканер или миниатюрная фотокамера, что 
существенно повышает точность и воспроизводимость результатов. 
Программное обеспечение дает возможность усредненного 
расчета оптической плотности отдельных фракций путем автомати-
ческого определения границ «дорожек» и многократного сканирова-
ния каждой из них в нескольких «разрезах», что позволяет исключить 
ошибки из-за локальных микродефектов и неровного положения но-
сителя, а также до определенной степени нивелировать искривление 
дорожки и влияние окрашенного фона при неполной отмывке.
На экран дисплея и на принтер выводится график-денсито-
грамма (рис. 9) с рассчитанным содержанием отдельных белковых 
фракций. При необходимости маркеры границ фракций на графике 
можно скорректировать, при этом будет произведен автоматический 
пересчет их показателей. В компьютере, как правило, создается архив 
электрофореграмм, их можно в любое время извлечь и просмотреть.
Рис. 9. Денситограф 

---

43 
Электрофорез в полиакриламидном геле
Полиакриламидный гель 
(ПААГ)
в виде поддерживающей 
среды при проведении электрофореза использовали в 1959 г.
Раймонд и Вейнтрауб (S. Raymond and L. Weintraub). Теорию метода 
разработали Орнштейн (L. Ornstein, 1964) и Дэвис (B. Davis, 1964).