Xxiv международная медико-биологическая конференция молодых исследователей Фундаментальная наука и клиническая

ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ЭКСТРАКТОВ КСЕНОГЕННОГО 
ПЕРИКАРДА НА ЭНДОТЕЛИАЛЬНЫЕ 
КЛЕТКИ ЛИНИИ EA.hy 926
Кузьмин В.С., студ., Бондаренко Н.А., к.б.н., н.с.
НИИКЭЛ — филиал ИЦиГ СО РАН,
Новосибирск, Россия
Научный руководитель: Бондаренко Н.А., к.б.н., н.с.
Бычий и свиной перикарды (СП) применяются для протези-
рования клапанов сердца и магистральных сосудов. Сшиваю-
щим агентом для биопротезов в кардиологии является глютаро-
вый альдегид (ГА). Его недостатками являются: токсичность, риск 
кальцификации с последующей дисфункцией протеза. В работе
в качестве альтернативных сшивающих агентов использовали ди-
глицидиловый эфир этиленгликоля (диэпоксид, ДЭЭ) и комбина-
цию ДЭ с 1,2,3,4,6-пента-O- {1- [2- (глицидилокси) этокси] этил}-D-
глюкопираноза (пентаэпоксид, ПЕ).
Цель работы: 
оценить влияние экстрактов СП и бычьего пери-
карда (БП), обработанного ди- и пентаэпоксидами на жизнеспособ-
ность культуры эндотелиальных клеток линии EA.hy 926 
in vitro
.
Материалы и методы. 
Объектами исследования являлись об-
разцы БП и СП с консервантами: ГА; ДЭЭ; 5% ДЭЭ (экспозиция 
10 дней), 2% 1,2,3,4,6-пента-O-{1-[2-(глицидилокси)этокси]этил}- 
D-глюкопиранозы (экспозиция 10 дней) (группа 10+10). Для иссле-
дования были приготовлены экстракты 3 групп: ГA, ДЭ , «10 + 10» 
БП и СП. Для получения экстрактов образцы культивировали в пол-
ной ростовой среде 72 ч при 37°С. Для определения уровня апопто-
за эндотелиальные клетки культивировали 24 ч в полной ростовой 
среде. Затем среду удаляли, добавляли 100 мкл супернатанта иссле-
дуемых биообразцов. Через 24 и 72 ч лунки промывали и добавляли 
в каждую лунку смесь красителей акридинового оранжевого этидий 
бромида. Клетки визуализировали с использованием микроскопа 
Axio Observer, считая минимум 500 клеток на образец. Данные были 
проанализированы с помощью Statistica 10.0 и представлены как 

---

ХИРУРГИЯ И ЕЕ БИОМЕДИЦИНСКИЕ ОСНОВЫ
885
среднее значение ± стандартное отклонение (SD). Статистически 
значимыми были приняты значения были при р<0,05.
Результаты: 
Через 24 часа наблюдения уровень апоптоза 
(25,9±0,6%; p=0,001) и некроза (8,2±4,4%) статистически значимо 
был выше под влиянием экстрактов БП с ГА в сравнении с другими 
группами. Наименьшие статистически значимые уровни апоптоза 
и некроза (0,33±0,04%) в клетках наблюдались в группе БП-10+10 
и СП-ДЭЭ (0,33±0,04; 0,65±0,01, p=0,001 соответственно). Через
72 часа наблюдения наибольший уровень апоптоза (8±2,3%) и некро-
за (3,25±0,1%) выявлялся в группе СП-ГА в сравнении с контролем 
и другими группами. Уровень апоптоза в клетках был выше в группе 
БП-ДЭЭ (2,5±0,9%) по сравнению с группой БП-10+10(0,7±0,1%). 
Выводы:
БП и СП, обработанные ДЭЭ и комбинацией 10+10 не 
обладают цитотоксичностью для эндотелиальных клеток. линии 
EA.hy926, а экстракты ГА оказывают токсическое влияние на жизне-
способность клеток. 

---

886
ХИРУРГИЯ И ЕЕ БИОМЕДИЦИНСКИЕ ОСНОВЫ