Сборник материалов всероссийской научно-практической конференции с международным участием

ВЛИЯНИЕ ИММУНИЗАЦИИ РЕКОМБИНАНТНЫМИ БЕЛКАМИ OPRF И 
ATOX PSEUDOMONAS AERUGINOSA НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ 
АКТИВНОСТЬ ФАГОЦИТОВ МЫШЕЙ 
 
Калиниченко Е.О.., Сходова С.А.,Ахматова Н.К.,Михайлова Н.А. 
ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова, г.Москва 
В ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова ведется разработка кандидатной 
вакцины против 
Pseudomonas aeruginosa 
на основе ее рекомбинантных белков OprF 
(белок наружной мембраны) и aTox (делеционной атоксической формы 
экзотоксина А), сорбированных на гидроксиде алюминия. При изучении действия 
вакцинного препарата важно изучить влияние иммунизации на показатели системы 
врожденного иммунитета, в том числе на функциональную активность лейкоцитов 
периферической крови.
 
Цель настоящего исследования - изучить
 
влияние иммунизации рекомбинатными 
белками OprF и aTox 
P. aeruginosa
на неспецифическую фагоцитарную активность 
лейкоцитов (против 
Staphyloccus aureus
).
 
Материалы и методы: 
Рекомбинантные белки
 
OprF (25 мкг) и aTox (50 мкг), 
сорбированные на 75 мкг гидроксида алюминия (ФГУП «НПО Микроген» МЗ РФ, 
Россия), вводили мышам-самкам линии BALB/с весом 14-16 г внутрибрюшинно в 
объеме 0,5 мл дважды с интервалом 2 недели. 
Фагоцитарную активность лейкоцитов периферической крови определяли по 
поглотительной способности убитых нагреванием FITC-меченых микробных 
клеток 
Staphylococcus aureus
гранулоцитами и моноцитами периферической крови 
иммунизированных мышей методом проточной цитометрии (Cytomix FC-500, 
Beckman Coulter).
Результаты
: На 7-ые сутки после первой иммунизации белками OprF и aTox 
отмечено повышение уровня фагоцитоза бактериальных клеток моноцитами в 1,82 
раз, гранулоцитами в 1,46 раз по сравнению с интактными мышами. Высокий 
уровень активности фагоцитов сохранялся также на 14-ые сутки (76,64% 

---

84 
моноцитов, повышение в 1,8 раз; 90,64% гранулоцитов, повышение в 1,7 раз по 
сравнению с контролем). 
Повторное введение антигенов не приводило к дополнительной стимуляции 
фагоцитов, так как уровень их активности на 7- и 14-ые сутки значимо снижался по 
сравнению с показателями после первой вакцинации (с 63,08% до 67,38-63,08% - 
моноциты; с 90,64% до 75,02-73,58%-гранулоциты), однако активность 
фагоцитирующих клеток оставалась достаточно высокой по сравнению с 
контрольной группой, превышая значения в 1,5 раза (моноциты) и 1,4 раза 
(гранулоциты). 
Заключение
. Введение мышам препарата приводило к усилению фагоцитарной 
активности лейкоцитов периферической крови по отношению к 
S. aureus
на все 
сроки наблюдения. Максимальное повышение численности фагоцитировавших 
моноцитов отмечено на 7-ые, а гранулоцитов - на 14-ые сутки после первой 
иммунизации. Бустерная иммунизация не приводила к дополнительной стимуляции 
фагоцитарной активности, но численность фагоцитировавших клеток была 
существенно (p<0,05) выше контроля (интактные мыши).
Таким образом, рекомбинантные белки синегнойной палочки OprF и aTox 
активируют клеточное звено иммунной системы с индукцией активности 
профессиональных фагоцитов.