Gost 8963-73 Ichimlik suvi. Sanitariya va bakteriologik tahlil usullari

4.2.2. Membranali filtrni tayyorlash.
N 2 yoki 3 membranali filtrlar, shuningdek yoriqlar, teshiklar va hokazolarni tekshirgan planktonli filtrlar N 6, stakanda (bug'lanish stakanida, emalda) 80 ° C gacha qizdirilgan distillangan suv yuzasiga birma-bir qo'yiladi. yirtqichlardan), va sekin sekin olovda qaynatib oling, shundan keyin suv almashtiriladi va 10 daqiqa davomida qaynatiladi. Suvning o'zgarishi va undan keyin qaynashi qoldiq erituvchilar filtrlardan to'liq chiqarilguncha 3-5 marta takrorlanadi, undan keyin ular foydalanishga tayyor bo'ladi. Tayyorlangan filtrlar quruq holda yoki distillangan suv solingan keng og'izda saqlanadi. Filtrlar ishlatishdan oldin distillangan suvda qaynatib sterilizatsiya qilinadi.
"Vladipor" markali MFA-MA N 5, 6, 7, 8 va 10 filtrlash membranalari, yoriqlar, teshiklar, pufakchalar va boshqalarni vizual ravishda tekshirib, qaynatish orqali sterilizatsiya qilinadi. Bunday holda, membranalarni burishining oldini olish uchun quyidagi qoidalarga qat'iy rioya qilish kerak. Qaynatish amalga oshiriladigan idishning pastki qismida (stakan, emalli idish va boshqalar), "sut qo'riqchisi" yoki zanglamaydigan po'lat to'rni qo'ying (shiddatli qaynashni cheklash uchun). Distillangan suv bu idishga ozgina miqdorda quyiladi, undagi filtr pardalarining erkin aylanishini cheklaydi, ammo sterilizatsiya qilinadigan filtr membranalari suv bilan qoplanishi uchun etarli bo'ladi. Distillangan suv idishda 80-90 ° S gacha keltiriladi, shundan so'ng isitishni kamaytirgandan so'ng filtr membranalari suv sathiga birma-bir qo'yiladi. Unga membranalari joylashtirilgan suv asta-sekin qaynatiladi va sekin olovda 10-15 daqiqa davomida qaynatiladi. Keyin suv drenajlanadi va uning o'rniga steril distillangan suv bilan oz miqdordagi (filtr membranalarini yopish uchun) almashtiriladi. Keyin filtr membranalari foydalanishga tayyor. Agar kerak bo'lsa, filtr membranalarini qayta qaynatish mumkin. (O'zgartirilgan nashr, N 1 o'zgartirish).
4.2.3. Filtrni apparatini tahlil qilish uchun tayyorlash
Suv ekishdan oldin filtr apparati spirtli ichimliklarga namlangan paxta sumkasi bilan artib bo'lgandan keyin yonib sterilizatsiya qilinadi. Sovutgandan so'ng steril membrana filtri filtrlash apparati (stol) ning pastki qismiga olovli pinset bilan o'rnatiladi, qurilmaning yuqori qismi (shisha, voronka) bilan presslanadi va qurilma dizayni bilan ta'minlangan moslama bilan o'rnatiladi.
4.2.4. Suvni filtrlash
Kerakli suv miqdori sterilizatsiya qoidalariga rioya qilgan holda filtrlash moslamasining voronkasiga (stakaniga) quyiladi va qabul qiluvchi idishda vakuum hosil bo'ladi. Birinchidan, kichikroq va keyin katta hajmdagi suvlar bitta filtr apparati orqali filtrlanadi, filtrlar har safar o'zgaradi. Kichik hajmdagi suvni (1 sm ) filtrlashda avval 10 sm steril suv voronkaga quyiladi , so'ngra tahlil qilingan suv qo'shiladi.
Filtrlash tugagandan so'ng, voronka olib tashlanadi, filtr pastki qismida ortiqcha namlikni yo'qotish uchun vakuum saqlanib, yonib turgan pinset bilan chetidan ehtiyotkorlik bilan ko'tariladi va keyin uni aylantirmasdan Endo muhitiga o'tkaziladi. muhit va filtr orasidagi havo pufakchalarini chetlab, Petri idishiga quyildi. Unda cho'ktirilgan bakteriyalar bo'lgan filtr yuzasi yuqoriga qarab turishi kerak.
Kubokning pastki qismidagi har bir filtr ostida yozuv suzilgan suv hajmi, emlash sanasi va namuna raqami ko'rsatilgan. Filtrlar tegmasligi sharti bilan bitta stakanga 3-4 filtr qo'yishingiz mumkin.
4.2.5. Agar tahlil qilinadigan suvda ko'p miqdordagi to'xtatilgan qattiq moddalar yoki fitoplankton hujayralari bo'lsa, u holda qo'pol suspenziyani olib tashlash uchun avval 6-filtr orqali filtrlanadi. Buning uchun No 6 filtri No 2 yoki 3 filtri ustidagi filtr qurilmasiga joylashtirilgan. Filtrlash tugagandan so'ng ikkala filtr Endo muhitiga o'tkaziladi. Tahlil natijalarini namoyish qilishda ikkala filtrda bakteriyalar o'sishi hisobga olinadi.
"Vladipor" markali MFA-MA filtrlovchi membranalari bilan ishlaganda, koliformni ushlab turuvchi asosiy membrana ustidagi filtrlash moslamasiga qo'yilgan qo'pol muallaq moddalarni olib tashlash uchun dastlabki membrana sifatida MFA-MA N 10 markali "Vladipor" membranasi ishlatiladi. bakteriyalar. Asosiy sifatida MFA-MA markali "Vladipor" filtri membranasi 5, 6, 7 yoki 8 ishlatiladi, filtrlash tugagandan so'ng dastlabki va asosiy membranalar Endo muhitiga o'tkaziladi. Sinov natijalarini aniqlashda ikkala filtr membranasida bakteriyalar o'sishi hisobga olinadi.
(O'zgartirilgan nashr, N 1 o'zgartirish).
4.2.6. Endo muhitida filtrlari bo'lgan plitalar teskari tomonga termostatga joylashtiriladi va (37 ± 0,5) ° S haroratda 18-24 soat davomida inkübe qilinadi.
4.2.7. Qayta ishlash natijalari
Filtrlarda biron bir koloniya bo'lmasa yoki faqat membranali, shimgichli, yuzasi va qirralari notekis bo'lsa, mog'or va E. coli uchun xarakterli bo'lmagan boshqa koloniyalar bo'lsa, ular tarkibida E. coli bakteriyasi borligi uchun salbiy natija beradi. tahlil qilingan suv hajmi. Ushbu bosqichdagi tahlil 18-24 soat ichida yakunlanadi.
4.2.8. Agar filtrlarda Escherichia coli uchun xos bo'lgan koloniyalar bo'lsa (to'q qizil, metall nashrida bilan va ularsiz, pushti, shaffof), har bir turdagi bir nechta koloniyalardan smearlar tayyorlanadi, ular Gram bilan bo'yalgan va mikroskop bilan ishlangan. Smearlarda gramm manfiy sporasiz tayoqchalarning yo'qligi salbiy javob beradi. Tahlil 18-24 soatdan keyin u yerda tugaydi.
4.2.9. Smearlarda grammusbat, kalta, polimorfik, spora hosil qilmaydigan tayoqlar mavjud bo'lsa (cho'zilgan filamentli shakllar, shuningdek, katta tayoqchalar, qutblangan), oksidaz sinovi o'tkaziladi (3.3.15.1-band).
4.2.10. 4.2.7-bandda sanab o'tilganlardan tashqari barcha koloniyalarda faol oksidaza mavjudligi salbiy natijaga imkon beradi.
4.2.11. Metall yaltiroqli va bo'lmagan to'q qizil (laktoza-musbat) koloniyalarda oksidaza yo'qligi ularni E. coli bakteriyasi deb tasniflashga va darhol ijobiy javob berishga imkon beradi.
Agar oksidaza faolligiga ega bo'lmagan boshqa koloniyalar bo'lmasa, ichimlik suvi tahlili ushbu bosqichda yakunlanishi mumkin.
Tozalash bosqichidagi suvni tahlil qilish 18-24 soatdan so'ng koli-indeksni hisoblash uchun ushbu koloniyalarni sanab yakunlanadi.
4.2.12. Agar filtratlarda salbiy oksidaza faolligi bo'lgan pushti va rangsiz koloniyalar bo'lsa, ular sanab olinadi va ularning E. coli guruhi bakteriyalariga mansubligi har bir turdagi 2-3 ta izolyatsiyalangan koloniyalarni glyukoza bilan yarim suyuq muhitga sepib tasdiqlanadi. . Buxgalteriya hisobi 4-5 soat inkubatsiyadan so'ng (37 ± 0,5) ° C da amalga oshiriladi. Agar kislota va gaz hosil bo'lsa, sinov natijasi ijobiy hisoblanadi. Kislota va gaz bo'lmasa, salbiy natija olinadi. Tahlil 24-28 soat ichida yakunlanadi.
Agar faqat kislota mavjud bo'lsa, naychalar 24 soatdan keyin yakuniy hisoblash uchun inkubatorda qoldiriladi, gaz hosil bo'lmaganda, 24 soatdan keyin yakuniy salbiy natija, agar gaz hosil bo'lsa, ijobiy natija olinadi.
4.2.13. Koli indeksini hisoblash.
Natija koli-indeks sifatida ifodalanadi, ya'ni. 1 dm 3 suvda Escherichia coli guruhi bakteriyalarining soni . Ichimlik suvi talablariga javob beradigan GOST 2874 coli indeksi 3. oshmaydi, agar *
_________________
* Rossiya Federatsiyasi hududida GOST R 51232-98 amal qiladi .
Koli-indeks quyidagicha hisoblanadi: tahlil qilingan suv hajmida o'sgan Escherichia coli guruhining bakteriyalari soni 1000 sm3 ga ko'paytiriladi va shu suv hajmiga bo'linadi.
Filtrlarda E. coli guruhining bakteriyalari bo'lmasa, koli-indeks tahlil qilingan hajmda bitta E. coli xujayrasi topilsa aniqlanadigan qiymatdan kam bo'ladi.
1-misol . 300 sm suv sepganda bitta koloniya ham o'smagan. (1 1000): 300 = 3. Coli indeksi 3 dan kam.
Escherichia coli guruhining bakteriyalari mavjud bo'lganda, tahlil qilingan suvning butun hajmini hisobga olgan holda koli-indeksini hisoblab chiqiladi.
2-misol . Har biri 100 sm bo'lgan uch hajmli suvni ekishda bitta filtrda E. coli guruhining uchta bakteriya koloniyasi o'sdi, qolgan ikkitasi o'smadi; koli indeksi (3 1000): 300 = 10. 10 va 100 sm3 suv emlanganda bitta filtrda bitta koloniya, ikkinchisida beshta koloniya o'sdi; koli indeksi (6 1000): 110 = 54 ga teng.
Agar filtrlardan birida bakteriyalarning uzluksiz ko'payishi va ularni hisoblash imkonsiz bo'lsa, unda filtrlash paytida filtrda izolyatsiya qilingan koloniyalar o'sadigan suv miqdori hisobga olinadi.
3-misol . 100 sm - qattiq o'sish, 10 sm - E. coli guruhining 12 bakteriyasi; koli indeksi (12 1000): 10 = 1200.
Najasli ifloslangan, dezinfektsiyalanmagan suv namunalarida koli indeksini hisoblashda, 10 sm3 dan kam suv miqdori yoki uning suyultirilishi tahlil qilish uchun filtrlanganda , kamida 10 ta va 30 dan ko'p bo'lmagan izolyatsiya qilingan koloniyalar bo'lgan filtr buxgalteriya hisobi uchun tanlangan E. coli guruhining bakteriyalariga tegishli bo'lgan koloniyalar soni, bu filtr orqali filtrlangan suv hajmini hisobga olgan holda, 1 dm3 ga qayta hisoblab chiqiladi . Agar barcha filtrlarda qalinroq o'sishga erishilsa va tahlilni takrorlash mumkin bo'lmasa, u holda filtrdagi koloniyalarni eng kam suyultirilgan holda, lekin o'rganish protokoliga va jurnalga yozib qo'yishga ruxsat beriladi.
Natija koli-indeks shaklida jurnalga va tahlil protokoliga kiritiladi, bu erda suvni tahlil qilish paytida yuz bergan maxsus holatlar qayd etilgan (inkubatsiya haroratidagi og'ishlar, ishlatilgan muhit tarkibi, ayniqsa qo'shimchalar Endo muhitiga va boshqalar).