Copper metallurgical slags: mineralogy, bio/weathering processes and metal bioleaching

vi) Anions measurement 
Sulfate, phosphate and nitrate concentrations in the solutions from bioweathering experiments 
were measured colorimetrically using Permachem reagents (HACH). The carbonates content 
was determined by titration with HCl.  
vii) Microbial metabolite measurement 
Microbially-derived  metabolites  were  analyzed  after  termination  of  bioweathering 
experiments.  The  fluorescence  properties  of  released  microbial  metabolites  were  analyzed 
using  three  dimensional  excitation-emission  spectrofluorophotometry  (Shimadzu  RF-5301 
PC)  equipped  with  a  150-W  Xenon  lamp.  The  fluorescence  matrixes  (3D-EEM)  were  done 
over an excitation (Ex) and emission (Em) range of 220-450 nm and 250-550 nm, respectively 
(Bourven et al., 2012). Measurement settings were fixed at 10 nm, scan wavelength intervals 
of 1 nm and a speed of 24 nm/s. Measurements were performed in 1 cm quartz optical cells. 
Prior to measurements, filtered (<0.22 µm) samples were diluted (15 µL/1000 µL) in 50 mM 
phosphate  buffer  adjusted  to  pH  of  7.0  (±0.1)  in  order  to  diminish  fluorescence  signal 
saturation  as  well  as  to  maintain  the  fluorescence  at  the  same  protonation  degree.  The  data 
was processed using Panorama fluorescence 3.1 software (LabCognition, Japan).