Biokimyo va molekulyar biologiya

18 – laboratoriya mashg`uloti

Muskul to’qimasidan oqsil fraksiyalarini ajratish
Asboblar va reaktivlar: shisha hovoncha, shisha voronka, 1 l li tumshuqli laborotoriya shisha stakani, dializ qilish uchun kolloid xaltacha, doka, qog’oz filtrlar, 10 % li natriy gidroksid, 1 % li kumush nitrat, ammoniy sulfat, 10% li natriy gidroksidi, 1 % li mis sulfat, ammoniy sulfat (to’yingan), muskul to’qimasi.

Albumin va globulinlar tabiiy manbalarda eng ko’p tarqalgan oqsillar hisoblanadi. Ular odatda birgalikda uchraydi. Ularni ajratish suvda eruvchanligiga va mineral tuzlarda cho’kishiga qarab amalga oshiriladi.

Albuminlar suvda va tuzlarning kuchli eritmalarida (tuzlarning 50 % li eritmasidan yuqori bo’lgan to’yingan eritmasida) eriydi. Globulinlar esa, faqat tuzlarning o’rtacha konsentratsiyasida (8-15 %li) eriydi. Tuzlarning juda yuqori va past konsentrasiyali eritmalarida globulinlarning eruvchanligi kamayadi.

Oqsillarning tuzli eritmasini olish. 10 g maydalangan muskul to’qimasi xovonchada 10-15 minut davomida 40-50 ml 10 % li natriy sulfatning eritmasi bilan aralashtirilgan holda ushlanadi. Natijada yarim suyuq massa hosil bo’ladi. Hosil bo’lgan massa 2 qavat dokadan suzib olinadi. Bu jarayon filtrat tiniqlashguncha davom ettiriladi. Filtrlash jarayoni sekin amalgam oshadi. Natijada 15-20 ml cha tiniq pushti-qizil rangli eritma olinadi. Hosil bo’lgan oqsilning tuzli aralashmasi tarkibida albuminlar va globulinlar bo’ladi. Bundan keyin ular dializ va tuzlash usullari bilan bir-birlaridan ajratiladi.