Amaliy enzimologiya

Tadqiqot materiallari va reagentlar
.
Sut xom va qaynatilgan, formaldegidning 1,5% eritmasi, metilen ko'kning 
0,02% eritmasi.

---

 
Asbob uskunalar:
Probirkalar solingan shtativ, 1 ml li pipetkalar, suv 
hammomi. 
 
Ishning borishi.
Ikkita probirka olib biriga 5 ml qaynatilgan sut – boshqa biriga xom sut 5 ml
quyiladi.
Har probirkaga ham 1 ml formaldegid eritmasi va 4 tomchi metilen ko'k eritmasi 
qo'shiladi.
Aralash aralashtiriladi va 37-40 ° s haroratda suv hammomiga solinadi.
Bir oz vaqt o'tgach, birinchi probirkagi sut ksantinoksidaza bilan katalizllangan 
metilen ko'kning qaytarilishi tufayli bo'yalmagan shaklga aylanadi. Bunday holda 
formaldehid chumoli kislotaga qadar oksidlanadi.
Ikkinchi probirkadagi qaynatilgan sut metilen ko'ki bilan rangsizlanmaydi bu 
jarayon fermentning issiqlik ta’sirida denaturatsiyasi tufayli sodir bo'ladi. 
 
3-
FERMENTLARNING FAOLLIGIGA PH MUHITINING TA'SIRI 
Tushuntirish.
Turli fermentlar uchun ma'lum pH qiymatlari (eritmaning 
kislotaligi) mavjud bo'lib, unda ferment eng faol (optimal pH) hisoblanadi. 
Masalan, pepsin uchun, pH optimal pH 1,5–2,5, ishqoriy fosfatazaga pH 9-10, 
so'lak amilazasi va boshqa fermentlar uchun optimal pH 6,8 bo’lib, kislotali va 
ishqoriy muhitda amilaza faoliyati kamayadi.
So'lak amilazasi uchun optimal pH ni kraxmalning turli pH qiymatlarida
gidroliz darajasini aniqlash yoli bilan aniqlash mumkin. Kraxmalning parchalanishi 
uning yod eritmasi bilan reaktsiyasi bilan baholanadi. Ma'lum bir pH qiymatida 
kraxmalning gidrolizi butunlay sodir bo'ladi, lekin bu pH nuqtadasi kislotali yoki 
gidroksidi muhitga siljihi bilan kraxmalning bparchalanishi qisman amalga oshadi 
yoki kraxmal hech qanday gidrolizga uchramay qoladi.