Amaliy enzimologiya

10 –MAVZU KARTOSHKANING KATALAZA FAOLLIGINI
ANIQLASH 
Tadqiqot materiallari va reaktivlar.
Kartoshka, 1% vodorod peroksid eritmasi, 10% sulfat kislota eritmasi, 0,1 n kaliy 
permanganat eritmasi.
Asbob uskunalar
100 ml li o’lchov kolbalari va 200 ml li koniki kolbalar, 5 va 20 
ml gacha bo'lgan pipetkalar, voronkalar, byuretkalar.
Ishning borishi.

---

Aniqlash jarayoni. 1 g xom kartoshkani chinni hovonchada kvarts qumi bilan 
maydalab, asta-sekin 2-3 ml suv solinadi. Muhitning kislotaliligini kamaytirish 
uchun spatel uchiga kaltsiy karbonatni angidridli pufakchalar chiqishi to'xtaguncha 
qo'shiladi.
Maydalangan massa miqdoriy hajmdagi kolbaga o'tkaziladi va suyuqlik hajmi 100 
ml gacha suv bilan keltiriladi. Aralashmani 30-60 daqiqa davomida saqlab turiladi 
va keyin buklangan filtr qog’oz orqali filtrlanadi. 200 ml bo'lgan ikkita konuk 
kolbalarida, o'lchash pipetkasi bilan 20 ml ekstrakti olib solinadi va ulardan biri 
qaynatiladi (nazorat namunasi). 
Ikkala kolbaga 2 ml 1% vodorod peroksid eritmasi qo'shiladi va xona haroratida 
30 min ga qoldiriladi.
Keyin katalaza ta'sirini to’xtatish uchun har bir kolbaga 3 ml 10% sulfat kislota 
qo'shiladi va vodorod peroksidning qoldiq miqdori 0,1 n kaliy permanganatning 
eritmasi bilan och pushti rang paydo bo'lguncha titrlanadi.
Nazorat va eksperimental titrlash o'rtasidagi farq, ferment ishtirokida ajratilgan 
vodorod peroksid miqdoriga teng bo'lgan permanganat miqdorini topish uchun 
ishlatiladi.
Misol. Nazorat namunasini titrlash uchun 8 ml, tajriba uchun 2 ml 0,1 N KMnO4 
eritmasi ishlatilgan deb taxmin qilaylik.
Katalaza bilan parchalanadigan vodorod peroksid miqdori 8 - 2 = 6 ml ni tashkil 
qiladi yoki 6 * 1,7 = 10,2 mg (1 ml 0,1 N KMnO4 eritmasi 1,7 mg vodorod 
peroksidga teng).
Binobarin, 1 g xom kartoshka tarkibida 30 daqiqada 10,2 * 5 = 51 mg vodorod 
peroksidini parchalashi mumkin bo'lgan katalaza miqdori mavjud.
Shunday qilib, m (H
2
O
2
) = (V
nazorat - Vtajriba) * 1.7 * 5