Проверка дизайна Гликогемоглобин HbAi

Проверка дизайна
Гликогемоглобин HbAi
СОДЕРЖАНИЕ
1 Принцип испытаний 2
1.1 Вычисление 2
2 Неточность 2
3 Эффективность лизинга и влияние альдимина 3
4 Линейность 4
4.1 Линейность с гликогемоглобиновым стандартом 5
5 Сравнение методов 5
6 Интерференция 5
7 6 Стабильность


1 Принцип теста
GLYCOHEMOGLOBIN HbA1 основан на ионообменном методе. Кровь человека гемолизируется специальным буферным составом, содержащим борат-ионы. Благодаря наличию борат-ионов достигается полное устранение лабильных оснований Шиффа. Затем гемолизированную кровь смешивают со слабой катионной ионообменной смолой. В этих условиях только фракция HbA0 связана с ионообменной смолой. После короткой инкубации смолу отделяют от супернатанта с помощью специальной разделительной трубки. Супернатант содержит фракцию HbA1, которая фотометрически измеряется при 415 нм. Общий гемоглобин измеряется аналогичным образом непосредственно из гемолизата. Стандарты для общего гемоглобина и фракции HbA1 используются для калибровки метода.
расчет
Коэффициент калибровки получается из соответствующей оптической плотности стандартов в соответствии со следующим уравнением:
Абс (общий стандарт Hb) * Стандарт HbA1,%
F =
Абс (стандарт HbA1)
Из этого калибровочного коэффициента рассчитывается содержание гликогемоглобина в образцах:
Abs (образец HbA1)
% HbA1 (образец) = * F
Abs (общий образец Hb)
2 Неточность
Неточность (внутрипроизводственного и ежедневного) гликогемоглобина HbA1 рассчитывалась по четырем определениям в течение пяти последовательных дней. В качестве материала образца использовали шесть сывороток пациентов с хранением в разных условиях. Неточность была проверена при 25 ° С.

3 Эффективность лизинга и влияние альдимина

Эффективность процедуры лизиса и возможное влияние форм альдимина были проверены на трех образцах крови пациентов, в которые была добавлена глюкоза (5 г / л и 20 г / л соответственно) и которые инкубировали в течение 3 часов при 37 ° С. Даже после 5 минут инкубации было достигнуто достаточное лизирование. Вмешательство альдимина было низким с 5 г / л глюкозы. Только очень высокие концентрации альдимина могут потребовать длительной инкубации во время стадии лизирования.


4 Линейность
Линейность GLYCOHEMOGLOBIN HbA1 контролировалась с помощью разведений высокого пула. Каждый отдельный результат представляет собой среднее из трехкратного определения. Из анализа линейной регрессии были рассчитаны теоретические значения гликогемоглобина. Восстановление рассчитывали по найденным и теоретическим результатам.


5 Сравнение методов
GLYCOHEMOGLOBIN HbA1 сравнивали с эталонным методом ВЭЖХ и с коммерчески доступным методом микроколонок. Для этого сравнения были использованы нативные образцы крови человека. Хорошее согласие было найдено между всеми методами.

Нормальный / ненормальный% диапазон может отличаться от метода к методу.

6 Интерференция
Вмешательство билирубина, глюкозы и триглицеридов было изучено путем добавления известных количеств потенциально мешающего вещества к известному образцу.
Извлечения были проанализированы в соответствии с методом Glick et al. (Clin.Cem. 1986, 32 470-5).