Monoklonal antitel;
Monoklonal áyyemgileri sonday ataladı, sebebi olar bir kletka kloni tárepinen islep shiǵarıladı. B-limfocitler mádeniy halda o'sirilse, bul hádiyseni baqlaw múmkin. Limfocitler, olardıń maydanına baylanısqanda, málim bir maqset yamasa antigen islep shıǵarıw ushın aktivlesiwi múmkin. Baylanısıw tek ǵana limfocitti tiyisli áyyemgilerin óndiriske qollaydı, bálki kletka bóliniwin da keltirip shıǵaradı, bul bolsa onıń klonlarining qáliplesiwine alıp keledi. Mádeniyatda antigen tárepinen aktivlestirilgen kletkalardıń bir bólegi bólinedi hám ápiwayı kóz menen kóriw múmkin bolǵan massalardı payda etedi. Bular bir túrdegi áyyemgi islep shıǵaratuǵın klonlar bolıp tabıladı. Kletka mádeniyatında gúzetiletuǵın bir túrdegi limfocitlerdiń bóliniwi organizmde de júz boladı.
Monoklonal antitelalar (MAT) bir antitela óndiriwshi kletkadan alınǵan immunitet kletkaları tárepinen shiǵarıladı. Sol sebepli MATlar tek " antigenik determinant" dep atalatuǵın immunogen elementtıń ayriqsha epitopiga qarsı qaratılǵan. MAT ni alıw ushın limfocitler immunizatsiya etilgen tıshqandıń talaqınan ajratıladı hám tıshqanchaning o'simta kletkaları (miyelom kletkaları ) menen birlestiriledi. Bul zárúr, sebebi mádeniyatda ántitela óndiriwshi limfocitlerdiń turmıslıqlıǵı tek bir neshe hápte menen sheklengen. O'simta kletkası menen birleskende gibrid kletkalar, yaǵnıy gibridomalar payda boladı, olar potentsial o'lmas boladı.
Kletka sintezi kem ushraytuǵın hádiyse bolıp, onıń chastotası polietilen glikol [PEG (PEG) ] qatnasıwında artadı. Nátiyjeli gibrid kletkalardı tańlaw baslanǵısh kulturani hipoksantin, aminopterin hám timidinni óz ishine alǵan HAT-medium (HAT-medium) de uzaq múddetli inkubatsiya qılıw waqtında ámelge asıriladı. Dihidrofolat kislotasınıń analogi bolǵan aminopterin básekige shıdamlı túrde dihidrofolat reduktazasini hám usınıń menen dTMP biosintezini payda etedi. dTMP DNK sintezi ushın zárúr bolǵanlıǵı sebepli, miyelom kletkaları aminopterin qatnasıwında aman qalalmaydi. Basqa tárepden, talaq kletkaları DNK sintezi ushın hipoksantin hám timidin járdeminde inhibitor tásirin engib ótiwleri múmkin, biraq olar da sheklengen waqıt dawamında bar. HAT ortalıǵında kultura retinde tek gibridoma saqlanıp qaladı, sebebi bul kletkalar miyelom kletkalarınıń o'lmasligiga hám talaq kletkalarınıń aminopteringa iykemlesiw qábiletine iye.
Tiykarınan, tek bir gibridoma kletkaları áyyemgiorlarni óndiriske ılayıq. Bunday kletkalar izolyatsiya etiliwi hám klonlash arqalı keńeytiriliwi kerek. Klonlarning antitelalar payda etiw qábileti tekserilgennen keyin oń kulturalar tańlap alınadı, olar taǵı klonlanadi hám keyingi seleksiyadan ótkeriledi. Nátiyjede monoklonal antitelalar payda etiwshi gibridoma alınadı. Bul kletkalar tárepinen monoklonal áyyemgiorlarni islep shıǵarıw ın vitro bioreaktorda yamasa ın vivo tıshqanchaning astsit suyıqlıǵında ámelge asıriladı.
Do'stlaringiz bilan baham: |