РЕАГЕНТЛАР
|
R1: Буфер
Фосфат буфер 100 ммоль/л pH 7,4 Фенол 0,62 ммоль/л R2: Субстрат
Глюкозооксидаза (GOD) > 12 ООО Ед./л Пероксидаза (POD) > 660 Ед./л 4-аминоантипирин 0,4 ммоль/л R3: Стандарт
Глюкоза 5,56 ммоль/л (100 мг/дл)
|
ИШЧИ РЕАГЕНТНИ ТАЙЁРЛАШ
|
R2 субстратни R1 буферда эхтиётлик билан аралаштириб эритинг
|
СТАБИЛЛИГИ
|
2-8 °С хароратда 6 ой, 15-25 °С да 3 хафта. Ёруглик тушмайдиган жойда сакланг.
|
НАМУНА
|
Зардоб. ЭДТА ёки гепаринли плазма.
|
УЛЧАШ ШАРТЛА- РИ
|
Тулкин узунлиги: 505 нм Харорат: 37 °С Кювета (оптик йул узунлиги): 1 см Ноль: реагентга карши
|
АНИКЛАШ ЙУЛИ:
|
|
Бланк
|
Стандарт/
Калибратор
|
Намуна
|
Ишчи реагент
|
0.5 мл (1 мл)
|
0.5 мл (1 мл)
|
0.5 мл (1 мл)
|
Стандарт
|
-
|
5 мкл (10 мкл)
|
-
|
Намуна
|
|
-
|
5 мкл (10 мкл)
|
Эхтиёткорлик билан аралаштиринг, 37 °С хароратда 15 дакика инкубация килинг, кейин улчашни утказинг. Х,осил булган ранг 60 дакика давомида стабил. Каве ичида стандарт кювета учун намуна ва реагентлар микдори курсатилган.
|
ХИСОБЛАШ:
|
А намуна
Глюкоза, ммоль/л = * стандарт конц.
А Стандарта
|
ЧИЗИКЛИЛИК:
|
27,8 ммоль/л (500 мг/дл) гача. Юкори концентрацияли намуналар дистилланган сув ёрдамида суюлтирилади, натижалар эса суюлти- риш даражасига купайтирилади.
|
МЕЪЁРИЙ
КУРСАТКИЧЛАР:
|
3,61 - 6,11 ммоль/л (65 - 110 мг/дл)
|
Глюкозани аниклашнинг клиник-диагностик ахдмияти.
Глюкоза алмашинуви патологиясида куйидаги холатлар кузатилиши мумкин: гипергликемия и гипогликемия.
Г ипергликемия - конда глюкоза концентрациясини меъёрий курсаткичдан ошиши.
Гипогликемия - глюкоза концентрациясининг меъёрий
курсаткичлар дан камайиши.
Кутарилиши: кандли диабет (катталар ва усмирларда), эндокрин касалликлар (тиреотоксикоз, акромегалия, гигантизм, Кушинг синдроми ва бошкалар.), ошкозон ости касалликлари (уткир ва сурункали панкреатит, му- ковисцидоз, ошкозон ости бези усмаси) жигар ва буйрак сурункали касалликлари, мияга кон куйилиши, уткир миокард инфаркта, стенокардия.
Камайиши: конда инсулин микдорини ошиши билан боглик (инсулин гиперсекрецияси билан кечувчи ошкозон ости бези касалликлари), буйрак уста безлари, ошкозон раки, фибросаркома. Эндокрин бузилишларда (аддисон касаллиги, гипотиреоз). Мышьяк, хлороформ, фосфор, алкогол, са- лицилатлар, антигистамин воситалар билан кучли захарланишларда.
Билирубин ва уни аницлаш
Пигмент алмашинувини характерловчи асосий курсаткич булиб билирубин ва унинг кон зардобидаги фракциялари хисобланади. Билирубин ва унинг махсулотлари - уробилин ва стеркобилин ут пигментларига киради. Ут пигментлари, асосан, эритроцитлар гемоглобинни парчаланиш жараёнида хосил булади. К^онда умумий билирубин, эркин (нотугри, коньюгирланмаган) ва богланган (тугри, коньюгирланган).
УМУМИЙ БИЛИРУБИННИ АНИКЛАШ УЧУН ДАСТУР ТУЗИШ
Усул номи
|
4- ёки Т тугмаларни босиш
|
TBIL
|
|
|
билан хдрф танланади.
|
|
|
Реакция тури
|
—» ёки 4— тугмалари билан
|
Охирги нукта
|
Тупламдаги
|
|
керакли режим танланади
|
|
кулланма
|
Ноль
|
|
0 сувга карши
|
-«-
|
Улчов бирлиги
|
|
umol/1
|
-«-
|
Х,арорат
|
|
37°С
|
|
Калибровка
|
|
Стандарт буйича
|
-«-
|
Стандарт концентра-
|
Клавиатура ёрдамида терила
|
|
Стандарт флаконида
|
цияси:
|
ди
|
|
курсатилган.
|
Проба цамсми
|
|
30,0 мкл
|
Тупламдаги
|
|
|
|
кулланма
|
Реагент 1 .\ажми
|
|
500 мкл
|
-«-
|
Реагент 2 х,ажми
|
|
0
|
-«-
|
Фильтр 1
|
—> ёки <— тугмалари билан
|
546
|
|
|
керакли режим танланади
|
|
|
Фильтр 2
|
-«-
|
-
|
-«-
|
Меъёр:
|
Клавиатура ёрдамида терила
|
|
-«-
|
Макс.
|
ди
|
17.0
|
|
Мин.
|
|
1.0
|
|
Чизикдилик:
Макс концентрация
|
|
340
|
|
Билирубин диметилсульфоксид (DMSO) иштрокида диазотланган сульфанил кислота билан реакцияга киришади ва азобилирубин х,осил килади. DMSO иштрок этмаганда реакцияга факат богланган билирубин киришади.
ПРИНЦИП
Умумий билирубин R1: Реагент
Сульфанил кислотаси DMSO
Хлорид кислота R2: Натрий нитрит
Богланган билирубин R1: Богланган реагент Сульфанил к-таси 32 ммоль/л
Хлорид кислота 165 моль/л
R2: Натрий нитрит 29 ммоль/л
32 ммоль/л 7 ммоль/л 165 ммоль/л 29 ммоль/л
РЕАГЕНТЛАР
ИШЧИ РЕА- ГЕНТНИ ТАЙЁР- ЛАШ
Ишлатиш учун тайёр. Ишчи реагентни тайёрлаш учун 9 мл R1 ва 0,3 мл R2 аралаштирилади. Ишчи реагент 2 - 8°С да, коронгида 5 кун давомида ярокли.
Реагентлар кадокда курсатилган кунгача ярокли. Хона хдроратида саклансин.
СТАБИЛЛИГИ
НАМУНА
Гемолиз булмаган зардоб.
Тулкин узунлиги Харорат
Кювета (опт. йул узунлиги) Ноль
546 нм (530 - 580 нм) хона хдрорати 1 см
дистилланган сувга карши
УЛЧАШ ШАРТ- ЛАРИ
А) УМУМИЙ БИЛИРУБИН
Стандарт учун бланк
Стандарт
Намуна учун бланк
Намуна
R1 +R2 R1
Намуна
Калибратор*
0,45(1,5) мл
0,45 (1,5) мл 30 (100) мкл
0,45 (1,5) мл 30 (100) мкл
0,45 (1,5) мл 30 (100) мкл
30 (100) мкл
АНИКЛАШ
УСУЛИНИНГ
КЕЧИШИ
Аралаштиринг, 10 дакика давомида инкубация килинг кейин бланкга карши оптик
зичликни улчанг. Хосил булган ранг коронгида 1 соат давомида стабил.
БОГЛАНГАН БИЛИРУБИН
Намуна учун бланк Намуна
R1+R2
R1
Намуна
0,45(1,5) мл 30 (100) мкл
0,45 (1,5) мл 30 (100) мкл
Аралаштиринг, роппа - роса 5 дакика инкубация килинг ва бланкга карши оптик зичликни улчанг. Каве ичида стандарт кювета учун намуна ва реагентлар микдори келтирилган.
ХЦСОБЛАШ:
(А2 -А1) Намуна (А2 -А 1) Станд.
х Калибратор концентрацияси
Do'stlaringiz bilan baham: |