ВЛИЯНИЯ КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК
BIFIDOBACTERIUM BIFIDUM
И ИХ ЭКЗОМЕТАБОЛИТОВ НА АКТИВАЦИЮ
Т-ЛИМФОЦИТОВ И NK-КЛЕТОК
В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
IN VITRO
Полянских Е.Д., студ., Лозовая П.Б., студ.
Тюменский государственный медицинский университет,
Тюмень, Россия
Научный руководитель: Костоломова Е.Г., к.б.н., доц.
Актуальность.
Род Bifidobacterium - это комменсальные микро-
организмы, обнаруженные в желудочно-кишечном тракте, которым
приписываются полезные свойства на местном и системном уров-
нях.
Цель исследования.
Изучить влияние Bifidobacterium bifidum
и их экзометаболитов на активацию Т-клеток и NK-клеток на моде-
ли
in vitro
.
Материалы и методы.
Использовали препарат «Бифидумбакте-
рин» штамм B. Bifidum 791. Мононуклеарные клетки (МНК) выде-
ляли из периферической крови 15 здоровых доноров, 2×10
6
кл/мл,
инкубировали в присутствии бактерий в соотношении 1:1 и экзо-
метаболитов в полной культуральной среде в течение 24 ч при 37°C
в атмосфере 5% CO
2
. Нестимулированные МНК использовали в ка-
честве отрицательного контроля. Для окрашивания МНК использо-
вали моноклональные антитела CD4, CD8, CD3, CD25, CD69, CD56,
Анализ субпопуляционного состава проводили на цитофлуориметре
Cytomics (Beckman Coulter, США). Результаты исследования. После
24 часов инкубации МНК с B. Bifidum жизнеспособность измеряли с
помощью витального красителя 7AAD. Она составила 91% для сре-
ды, 49% с B. Bifidum, 74% с экзометаболитами. Маркеры активации
оценивали только в жизнеспособных клетках. Бактерии не влияли
на экспрессию CD69 CD3+CD4+ клетками, однако метаболиты уве-
личивали экспрессию CD69 Th-клетками (3,24±0,98% и 0,69±0,2%
в контроле). И бактерии и экзометаболиты увеличивали относи-
тельное количество CD69+ клеток в субпопуляции CD3+ CD8+
ИММУНОЛОГИЯ, АЛЛЕРГОЛОГИЯ, АУТОИММУНОЛОГИЯ
157
Т-лимфоцитов (6,88±2,13 и 11,34±2,2 против 1,92±0,6 в контроле со-
ответственно). B.bifidum и их экзометаболиты преимущественно
усиливают активацию цитотоксических лимфоцитов. Бактерии не
влияли на экспрессию CD25 Т-клетками, Th или Ts-клетками. Ме-
таболиты B.bifidum значительно индуцировал экспрессию CD25
Т-цитотоксическими клетками (2,59%±0,88). NK-клетки являются
компонентом неспецифического иммунного ответа. В эксперименте
было получено значительное увеличение экспрессии CD69 и CD25
NK-клетками при сокультивировании с бактериями и с продуктами
их метаболизма (55,91± 4,32; 89,11±2,99 и 8,19±0,96; 23,72±1,73; кон-
трольные цифры 4,0%±0,35 и 0,19%±0,08 соответственно).
Вывод.
B.bifidum и экзометаболиты оказывают разные иммуно-
модулирующее действие на клетки неспецефического и адаптивного
иммунитета.
158
ИММУНОЛОГИЯ, АЛЛЕРГОЛОГИЯ, АУТОИММУНОЛОГИЯ
Do'stlaringiz bilan baham: |