Xxiv международная медико-биологическая конференция молодых исследователей Фундаментальная наука и клиническая

Цель. 
Разработка протокола для выделения специфичной фрак-
ции экзосом с использованием подходов клик-химии. 
Материалы и методы. 
ВНВ плазмы были выделены с помощью 
составной полимерной системы, окрашены красителем СМ-Dil, 
очищены путем эксклюзионной хроматографии. Для создания ком-
плекса, связывающего PSMA(+)ВНВ, использовали ДНК-аптамер,
специфичный к белку PSMA, меченый алкином, и Cy 5.5 и магнитные 
частицы с NH2 группой. Соединение аптамера и частиц осуществля-
лось методом клик-химии. Оценка эффективности формирования 

---

ОНКОЛОГИЯ, ОНКОГЕМАТОЛОГИЯ И ИХ БИОМЕДИЦИНСКИЕ ОСНОВЫ
449
комплекса и выделения PSMA(+)ВНВ проводилась методом проточ-
ной цитометрии.
Результаты.
После серии экспериментов были подобраны оп-
тимальные условия: концентрация магнитных частиц — 1 мг/мл, 
концентрация аптамера — 50 пМоль, температура — 4°C, время 
реакции — 15-16 часов, присутствие раствора DMSO, при которых 
50% частиц были связаны с аптамерами. Разработан протокол «бло-
кировки» комплекса перед его инкубацией с ВНВ плазмы, который 
повышает специфичность связывания PSMA(+)ВНВ. Оптимизиро-
ваны условия выделения PSMA(+)ВНВ, путем оценки эффективно-
сти связывания ВНВ, меченных CM-Dil и оценки эффекта снижения 
концентрации PSMA(+)ВНВ в исходной смеси. 
Выводы. 
Разработанный метод по эффективности в 2 раза пре-
вышает сходные методики, использующие антитела. Кроме того, 
полученный комплекс аптамер-магнитные частицы стабилен в те-
чение долгого времени. Разработанная технология может быть мас-
штабирована для создания и оценки клинической эффективности 
нового метода диагностики РПЖ. 

---

450
ОНКОЛОГИЯ, ОНКОГЕМАТОЛОГИЯ И ИХ БИОМЕДИЦИНСКИЕ ОСНОВЫ