Tahlilni xromatografik usullari, tasnifi va sifat tahlilda qo`llanishi

1.6.5. Planar xromatografiya. Planar xromatografiya yupqa qatlam va qog'oz xromatografiyasini o'z ichiga oladi. Ushbu turdagi suyuq xromatografiya texnikasi sodda, ekspress, qimmat uskunalarni talab qilmaydi, bu ularning shubhasiz afzalligi hisoblanadi.
Ushbu usullar bilan moddalar aralashmasini ajratish turli xromatografik tizimlar yordamida amalga oshirilishi mumkin. Shuning uchun adsorbsiya, taqsimot, normal va teskari faza, ion almashish va boshqalar, qog'oz va yupqa qatlamli xromatografiya farqlanadi. Hozirgi vaqtda yupqa qatlamli xromatografiya eng keng tarqalgan.
Qog'oz va yupqa qatlamli xromatografiya texnikada o'xshashdir. Tsellyuloza qog'oz tolasi qog'oz xromatografiyasida statsionar faza sifatida, yupqa qatlamli xromatografiyada - shisha, metall ustida bir xil yupqa (100-300 mkm) qatlamda yotqizilgan turli sorbentlar (Al 2 O 3, silikagel va boshqalar) ishlatiladi. yoki plastik substrat (tashuvchi) . Qo'llab-quvvatlash ustidagi adsorbent qatlami o'rnatilishi yoki mahkamlanmasligi mumkin.
Planar usullarda, shuningdek, kolonkada xromatografik ajratish, ajratiladigan moddalarning tarqalish koeffitsientlariga muvofiq har xil tezlikda harakatlanuvchi faza tomonidan statsionar faza qatlami bo'ylab tahlil qiluvchi moddaning tarkibiy qismlarini o'tkazish bilan bog'liq. . Ikkala holatda ham suyuq-qattiq sorbent xromatografik tizimlar (adsorbsion ajratish mexanizmi), suyuqlik-suyuqlik-qattiq tashuvchi (tarqatish, ion almashish va boshqa mexanizmlar) qo'llaniladi.
Har xil erituvchilar yoki ularning aralashmalari, organik yoki noorganik kislotalar mobil fazalar sifatida ishlatiladi.
Planar xromatogrammalarni amaliy olish quyidagilardan iborat.
Xromatografik qog'oz tasmasida yoki yupqa sorbent qatlamida chiziq yoki plastinkaning pastki chetidan 1 sm masofada qalam bilan boshlang'ich chiziq belgilanadi. Diametri 2-3 mm dan oshmaydigan nuqta shaklida namunani boshlang'ich chiziqqa qo'llash uchun mikropipet ishlatiladi. Keyin chiziq yoki plastinkaning qirrasi muhrlangan kamerada joylashgan mobil fazali idishga tushiriladi. Harakatlanuvchi faza chiziq yoki plastinka bo‘ylab ko‘tarilishi va xromatografiyada keng tarqalgan sorbtsiya-desorbsiya, ikki suyuqlik fazalari o‘rtasida taqsimlanish, ion almashinuvi va hokazolarning ko‘p elementar aktlari sodir bo‘lganda, tahlil qilinayotgan aralashmaning tarkibiy qismlari ajratiladi. Jarayon odatda erituvchi boshlang'ich chizig'idan 10 sm o'tib ketguncha davom ettiriladi.Shundan so'ng, lenta yoki plastinka kameradan chiqariladi va quritiladi. Agar tahlil qiluvchi moddaning tarkibiy qismlari rangli bo'lsa, ular xromatogrammada mos rangli dog'larni beradi. Analitning bo'yalmagan komponentlarini aniqlash uchun xromatogramma ishlab chiqilishi kerak. Xromatogrammani ishlab chiqish va namuna komponentlarini aniqlash turli usullar bilan amalga oshirilishi mumkin va tahlil qilinadigan aralashmalarning tarkibiga bog'liq. Namoyish qilish mumkin:
- UV nurlaridan foydalanish. Usul ultrabinafsha nurlanishi ta'sirida ko'rinadigan to'lqin uzunligi diapazonida o'z nurlanishini (luminesans) chiqarishga qodir bo'lgan moddalarni aniqlash uchun qo'llaniladi;
 reagent-ishlab chiquvchilar yordamida. Masalan, tahlil qilinayotgan aralashmada aminokislotalar mavjudligini ningidrin yordamida aniqlash mumkin. Quritilgan xromatogramma ningidrinning atsetondagi 0,2% li eritmasiga botiriladi, keyin quritiladi. Aralashmaning turli tarkibiy qismlariga mos keladigan dog'lar har bir modda uchun vizual va qoida tariqasida o'ziga xos rangga ega bo'ladi;
- yoddan foydalanish. Bunday holda, aniqlangan xromatogramma idishga kiritiladi, uning pastki qismida yod kristallari mavjud. Yod bug'lari dog'larga kuchliroq adsorbsiyalanadi, buning natijasida dog'lar ingl. Yod o'ziga xos bo'lmagan ishlab chiquvchi reaktivdir. Maxsus reagentlar yordamida aralashmaning tarkibiy qismlarining sonini aniqlash emas, balki ajratilgan moddalarni dog'lar rangi bilan aniqlash mumkin.
Qog'oz va yupqa qatlamli xromatografiya ko'pincha yuqorida tavsiflangan ko'tarilish variantida amalga oshiriladi. Ko'pincha, xromatogrammalarning sifatini yaxshilash uchun planar xromatografiyaning murakkab variantlarini, masalan, yuqoridan pastga, aylana, ikki o'lchovli variantlardan foydalanish kerak. Qog'oz yoki yupqa qatlamli pastga xromatografiyada tahlil qilinadigan modda plastinka yoki qog'oz chiziqning yuqori qismidagi boshlang'ich chizig'iga qo'llaniladi va elyuent pastdan o'rniga yuqoridan beriladi. Yaxshilangan ajratishning ijobiy ta'siri tarkibiy qismlarning tortishish kuchlarining ajratish jarayoniga qo'shgan hissasi bilan bog'liq.
Yuqori va quyi oqim xromatografiyasi bir va ikki o'lchovli versiyalarda amalga oshirilishi mumkin. Yuqorida tavsiflangan bir o'lchovli tekis qatlamli ajratish jarayonidan farqli o'laroq, ikki o'lchovli xromatografik ajratishda tahlil qilinadigan namunani ajratish birinchi navbatda bitta erituvchida amalga oshiriladi, so'ngra ajratish birinchisiga perpendikulyar yo'nalishda amalga oshiriladi. birinchi xromatogrammani 90 ° C ga aylantiradigan boshqa erituvchi.
Dumaloq xromatografiyada analit plastinka yoki xromatografik qog'ozning o'rtasiga tomchi shaklida qo'llaniladi. Bu erda bir yoki bir nechta erituvchilar ham tomchilab qo'shiladi. Bu natijada olingan xromatogramma radial dog'lar to'plami ekanligiga olib keladi.
Yassi xromatogrammada tahlil qiluvchi moddaning ajratilgan tarkibiy qismlarini tashkil etuvchi dog'lar (zonalar) ning holati nozik qatlamdagi komponentlarning nisbiy harakat tezligi qiymatlari bilan tavsiflanadi. R fi. Eksperimental qiymat R fi masofaning nisbati sifatida aniqlanadi L i, o'tdi i-chi komponent, masofaga L hal qiluvchi tomonidan boshlang'ich chiziqdan oldingi chiziqqa o'tdi (1.10-rasm):
Qiymat R fi tahlil qilinayotgan namunaning tegishli komponentining tabiatiga, statsionar fazaning xarakteriga, uning qalinligiga, harakatlanuvchi fazaning tabiati va sifatiga, namunani qo'llash usuliga va boshqa omillarga bog'liq, lekin har doim R fi 1.
Qiymat R fi aslida moddaning saqlanish vaqti yoki uning saqlanish hajmi bilan bir xil bo'lib, u moddaning xromatografik ustun orqali o'tish tezligini tavsiflaydi va tahlil qilinayotgan namunaning tarkibiy qismlarini sifat jihatidan aniqlash uchun ishlatilishi mumkin va nuqta diametri bir xil bo'ladi. xromatografik cho'qqining balandligi yoki maydoniga va shuning uchun ma'lum darajada moddaning miqdoriy tarkibini aks ettiradi.
Eng oddiy holatda tahlil qilinadigan namunaning tarkibini miqdoriy aniqlash dog'larning ichki rangining intensivligi yoki UVni aniqlash paytida olingan dog'larning lyuminestsent nurlanishining intensivligi bilan vizual tarzda baholanishi mumkin. Ushbu maqsadlar uchun xromatografik dog'larni elyusiyadan keng foydalaniladi. Bunday holda, xromatogrammada olingan nuqta ehtiyotkorlik bilan kesiladi yoki qirib tashlanadi, mos erituvchi bilan ishlanadi va hosil bo'lgan eritma tegishli fizik-kimyoviy usulda tekshiriladi. Gravimetrik usuldan ham foydalanishingiz mumkin, bunda mos keladigan nuqta xromatogrammadan kesiladi va tortiladi. Moddaning miqdori bir xil maydondagi toza qog'oz va modda bilan qog'oz og'irliklarining farqi bilan aniqlanadi.