1.6.1. Adsorbsion suyuqlik xromatografiyasi. Adsorbsion suyuqlik xromatografiyasi statsionar va harakatlanuvchi fazalarning qutblanishiga qarab, normal fazali (NPC) va teskari fazali (RPC) xromatografiyaga bo‘linadi. NPCda qutbli adsorbent va qutb bo'lmagan mobil fazalar qo'llaniladi; OFCda qutbsiz adsorbent va qutbli mobil fazalar qo'llaniladi, lekin ikkala holatda ham mobil fazani tanlash ko'pincha linzalarni tanlashdan ko'ra muhimroqdir. statsionar. Statsionar faza ajratiladigan moddalarni ushlab turishi kerak. Mobil faza, ya'ni hal qiluvchi, o'rtacha vaqt ichida turli xil ustun quvvatlarini va samarali ajratishni ta'minlashi kerak.
Adsorbsion suyuqlik xromatografiyasida statsionar faza sifatida o'ziga xos sirt maydoni 50 m 2 / g dan ortiq bo'lgan qutbli va qutbsiz nozik dispersli gözenekli materiallar ishlatiladi. Polar adsorbentlar (SiO 2, Al 2 O 3, florisil va boshqalar) sirtda asosiy xususiyatlarga ega moddalarni ushlab turishga qodir bo'lgan zaif kislotali guruhlarga ega. Bu adsorbentlar asosan qutbsiz va o'rta qutbli birikmalarni ajratish uchun ishlatiladi. Ularning kamchiliklari - ishlatiladigan eluentlardagi suv tarkibiga yuqori sezuvchanlik. Ushbu kamchilikni bartaraf etish uchun qutbli sorbentlarga aminlar, diollar va boshqa reagentlar bilan ishlov beriladi, natijada bu reagentlarning sirtini payvandlash, sirt o'zgarishi va tahlil qiluvchi moddalarga nisbatan selektivlik o'zgaradi.
Qutbsiz adsorbentlar (grafitlangan kuyikish, diatomit, kizelgur) qutbli molekulalar uchun tanlanmaydi. Polar bo'lmagan adsorbentlarni olish uchun qutbsiz guruhlar ko'pincha sirtga payvandlanadi, masalan, silikagel, masalan, alkilsilil - SiR 3, bu erda R - alkil guruhlari C 2 - C 22.
Ko'chma faza tahlil qilingan namunani to'liq eritishi, past yopishqoqlikka ega bo'lishi kerak (diffuziya koeffitsientlari etarlicha katta bo'lishi uchun), undan ajratilgan tarkibiy qismlarni ajratish mumkin bo'lishi maqsadga muvofiqdir. Xromatografning barcha qismlari materiallariga nisbatan inert, xavfsiz, arzon, detektor uchun mos bo'lishi kerak.
Suyuq xromatografiyada qo'llaniladigan harakatchan fazalar o'zlarining elutsiya kuchi bilan farqlanadi. Erituvchining elutivlik kuchi ma'lum adsorbentda berilgan elimyutentning sorbsiya energiyasi standart sifatida tanlangan eluentning, masalan, n-geptanning sorbsiya energiyasidan necha marta katta ekanligini ko'rsatadi. Kuchsiz erituvchilar statsionar faza tomonidan yomon adsorbsiyalanadi, shuning uchun sorblangan moddalarning (sorbat) tarqalish koeffitsientlari yuqori. Aksincha, kuchli erituvchilar yaxshi adsorbilanadi, shuning uchun sorbatning bo'linish koeffitsientlari past bo'ladi. Erituvchi qanchalik kuchli bo'lsa, undagi tahlil qilinadigan namunaning eruvchanligi qanchalik yuqori bo'lsa, erituvchi-sorbatning o'zaro ta'siri shunchalik kuchli bo'ladi.
Ustun ustidagi yuqori ajratish samaradorligini ta'minlash uchun tanlangan ajratish sharoitida aralashmaning ajratilishi uchun optimal polaritega ega bo'lgan mobil fazani tanlash kerak. Odatda, birinchi navbatda statsionar faza tanlanadi, u ajratiladigan komponentlarga yaqin polariteye ega. Keyin sig'im koeffitsientini ta'minlab, mobil faza tanlanadi k" 2 dan 5 gacha bo'lgan oraliqda bo'lib chiqdi. Agar mobil fazaning qutbliligi statsionar fazaning qutbliligiga juda yaqin bo'lsa, komponentlarning ushlab turish vaqti juda qisqa bo'ladi va agar mobil va statsionar polarite fazalar juda farq qiladi, saqlash muddati juda uzun bo'ladi.
Mobil fazalarni tanlashda ular qutb ko'rsatkichlaridan foydalanishga asoslangan eluotropik qatorlar tomonidan boshqariladi. Snayder R", bu barcha erituvchilarni kuchli (qutbli) va kuchsiz (zaif qutbli va qutbsiz) ga ajratadi. Polarlik shkalasi dioksan, nitrometan va etanolda harakatlanuvchi fazalar sifatida ishlatiladigan moddalarning eruvchanligiga asoslanadi.
1.2-jadvalda ko'chma fazalar sifatida suyuq xromatografiyada eng ko'p ishlatiladigan bir qator erituvchilarning qutblanish indeksi va elutsiya kuchi (SiO 2 ga nisbatan) qiymatlari ko'rsatilgan. Ushbu erituvchilarning qisqa to'lqinli shaffoflik chegaralari ham bu erda ko'rsatilgan, bu aralashmaning tarkibiy qismlarini aniqlash uchun sharoitlarni tanlashni osonlashtiradi.
1.2-jadval
Do'stlaringiz bilan baham: |