АНТАГОНИСТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ШТАММА В ОТНОШЕНИИ ПАТОГЕННЫХ И УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ.
Для определения специфической активности штамма исследовали антагонистическую активность в отношении тест культур патогенных микроорганизмов, вызывающих заболевания животных. Исследование осуществляли методом отсроченного антагонизма. Для этого культуру штамма высевали петлей в центре чашки Петри с агаризованной средой Гаузе N2. Посевы инкубировали в термостате при 37 С в течение 72 часов. Затем к выросшей культуре подсевали штрихом тест-микроорганизмы (500-миллионные суспензии суточных культур в физиологическом растворе). Учет результатов проводили через 18 ч инкубирования при 37 С по величине зон отсутствия роста тест-культур. Контролем роста тест-культур служило параллельное выращивание их на чашках с агаризованной средой Гаузе N2 без культуры исследуемого штамма. Полученные данные результатов испытания представлены в таблице 1.
Таблица 1.
Спектр антагонистической активности штамма Bacillus subtilis 12B с разным содержанием живых бактериальных клеток
Тест –культуры
|
Зоны задержки роста (мм) тестовых штаммов, мм
|
1х108 кл/мл
|
5х108
|
1х109
|
5х109
|
10х109
|
1
|
2
|
3
|
4
|
5
|
6
|
Shigella sonne 2586
|
12-15
|
12-15
|
15-20
|
15-20
|
18-20
|
Shigella HK
|
20-25
|
20-25
|
25-30
|
25-30
|
28-30
|
Proteus mirabilis 40
|
15-20
|
15-20
|
20-25
|
20-25
|
25-27
|
P. mirabilis 36
|
15-18
|
15-18
|
15-20
|
15-20
|
18-20
|
P. mirabilis 35
|
15-20
|
15-20
|
20-25
|
20-25
|
22-25
|
Proteus vulgaris 12
|
10-12
|
10-12
|
15-18
|
15-20
|
17-20
|
1
|
2
|
3
|
4
|
5
|
6
|
P. vulgaris 48
|
12-15
|
12-15
|
15-20
|
15-20
|
17-20
|
P. vulgaris 41
|
10-12
|
10-12
|
15-20
|
15-20
|
18-22
|
Pseudomonas aeruginosa 126
|
15-20
|
15-20
|
15-20
|
15-20
|
15-20
|
P. aeruginosa 8
|
12-15
|
12-15
|
15-20
|
15-20
|
15-22
|
Escherihia coli 154
|
12-15
|
12-15
|
15-20
|
15-20
|
18-25
|
E. coli 140
|
12-15
|
12-15
|
15-20
|
15-20
|
15-20
|
Streptococcus 321
|
10-15
|
10-15
|
15-18
|
15-18
|
15-18
|
Streptococcus 325
|
12-15
|
12-15
|
15-20
|
18-20
|
18-20
|
Streptococcus 191
|
10-12
|
10-12
|
15-20
|
15-20
|
15-20
|
Staphylococcus aureus 66
|
15-16
|
15-16
|
15-18
|
20-25
|
20-22
|
St. aureus 67
|
8-10
|
8-10
|
10-15
|
10-15
|
12-15
|
St. aureus 80
|
12-15
|
12-15
|
15-20
|
15-20
|
17-20
|
Paratyhv 269
|
12-15
|
12-15
|
18-20
|
18-20
|
17-20
|
Paratyhv 15
|
15-20
|
15-20
|
20-25
|
20-25
|
22-25
|
Hexaere II 1230
|
22-25
|
22-25
|
25-30
|
25-30
|
28-30
|
Как следует из данных таблицы культура штамма Bacillus subtilis 12B характеризуется высокой антагонистической активностью в отношении широкого спектра патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, вызывающих инфекционные заболевания у животных.
ИЗУЧЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ШТАММА BACILLUS SUBTILIS 12B К АНТИБИОТИКАМ.
Широкий спектр антагонистической активности позволяет рекомендовать пробиотики на основе штамма Bacillus subtilis 12B вместо антибиотиков для вытеснения патогенной микрофлоры, особенно при острых кишечных инфекциях.
В отличии от готовых антибиотиков, к споровым пробиотикам не возникает привыкания и не вырабатывается устойчивости у болезнетворных микроорганизмов, поскольку бациллы продуцируют не отдельные антибиотики, а «семейства» пептидных антибиотиков сходных по базовой структуре, но отличающихся по концевым группировкам. Антибиотическое действие их оказывается разнообразным, а формирование устойчивых вариантов микроорганизмов замедленным (Филин В.А. и др., 1998).
Преимущество химически-синтезированных антибиотиков - в скорости терапевтического эффекта, антибиотики действуют быстрее. Поэтому в острый период заболевания, как правило, ветеринары не могут отказаться от антибиотиков и в первые 1-2 дня назначают одновременно и антибиотики и пробиотики на основе сенной палочки, но сокращают срок дачи антибиотика до 1-2-3 дней, в зависимости от состояния. При невозможности использовать антибиотики (непереносимости или неэффективности имеющихся антибиотиков) можно использовать только пробиотик, но повысить дозу в 5-10 раз в первые 3 дня лечения, поскольку пробиотики, как правило, безвредны.
Поскольку в некоторых случаях лечения инфекционных заболеваний необходимо одновременное назначение антибиотика и пробиотика проведено изучение чувствительности штамма Bacillus subtilis 12B к антибиотикам.
Определение чувствительности штамма к антибиотикам изучали диско-диффузионным методом, используя стандартне диски, пропитанные антибиотиками. Штамм высевали на агаризованную питательную среду и раскладывали диски с антибиотиками, по 5 на чашку Петри. Посевы инкубировали при 37 50 0С в течение 24 ч. Чувствительность культур к антибиотикам выражали в мм диаметра зон задержки роста. Резистентными считали штаммы, зоны задержки роста которых составили - (0-5) мм; малочувствительными (6-10) мм чувствительными - (11-20) мм; высокочувствительными – более 22 мм. Результаты исследования представлены в таблице 2.
Из данных таблицы следует, что штамм B. subtilis 12B обладает широкой устойчивостью к антибиотикам, в том числе : линкомицину, тетрациклину, мономицину, полимиксину, оксациллину, стрептомицину, ампицилину, бензилпенициллину.
Таблица 2
№
|
Антибиотики
|
Зона задержки роста, мм
|
|
эритромицин
|
8-10
|
|
олеандомицин
|
10-12
|
|
карбенициллин
|
18-20
|
|
линкомицин
|
6-8
|
|
левомицитин
|
20-22
|
|
тетрациклин
|
6-9
|
|
мономицин
|
8-10
|
|
полимиксин
|
0
|
|
оксациллин
|
0
|
|
ампициллин
|
0
|
|
гептомицин
|
10-15
|
|
неомицин
|
6-8
|
|
цепарин
|
15-20
|
|
канамицин
|
10-15
|
|
новограмон
|
20-25
|
|
5-НОК
|
20-25
|
|
бисенгиол
|
10-15
|
|
тобрамицин
|
0
|
|
клафоран
|
15-20
|
|
бензилпенициллин
|
0
|
|
рифампицин
|
8-10
|
|
гентамицин
|
8-10
|
|
стрептомицин
|
0
|
|
ристомицин
|
8-10
|
|
доксициклин
|
10-12
|
Препарат-пробиотик на основе штамма Bacillus subtilis 12B можно назначать одновременно с антибиотиками к действию которых он проявляет устойчивость, без существенного снижения активности препарата.
Do'stlaringiz bilan baham: |