Субстратная специфичность иммуноглобулинов класса G человека,
обладающих оксидоредуктазными активностями
Толмачева А.С., Невинский Г.А.
Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН,
Новосибирск, Россия
В настоящее время показано, что иммуноглобулины класса G человека и животных
обладают супероксиддисмутазной и каталазной активностями.
В данной работе установлено, что иммуноглобулины класса G крови здоровых
доноров проявляют два типа активности: пероксидазную (в присутствии H
2
O
2
) и
оксидоредуктазную (в отсутствие H
2
O
2
). На основании выполнения общепринятых
критериев, таких как электрофоретическая гомогенность препаратов IgG, гель-
фильтрация в условиях «кислого шока», аффинная хроматография IgG на анти-L-
сефарозе, а также анализ активности препаратов антител
in situ
, доказано, что эти
активности принадлежат непосредственно антителам.
Известно, что пероксидазы и оксидоредуктазы млекопитающих характеризуются
широкой субстратной специфичностью и окисляют различные органические соеди-
нения, такие как ароматические амины, фенолы, нафтолы, многие из которых известны
как мутагены или канцерогены, а также катехоламины, стероидные гормоны и другие
биологически активные молекулы.
Впервые показано, что IgG крови здоровых доноров, эффективно окисляют различные
соединения: 3,3'-диаминобензидин (DAB), диаммониевую соль 2,2'-азино-бис(3-этилбен-
зотиазолин-6-сульфокислоты) (ABTS),
o
-фенилендиамин (OPD), гомованилиновую кисло-
ту (HVA), α-нафтол, гидрохинон, 5-аминосалициловую кислоту (5-ASA) и 3-амино-9-этил-
карбазол (AEC). Определены значения кажущихся
k
cat
, характеризующих окисление дан-
ных соединений при их фиксированной концентрации. Среднее значение кажущихся
k
cat
(мин
-1
) при H
2
O
2
-зависимом окислении субстратов иммуноглобулинами G умень-
шалось в следующем порядке: ABTS (73,7 ± 12,0) ≥ DAB (66,3 ± 12,0) > AEC (38,0 ± 8,5) >
HVA (19,8 ± 5,6) ≥ α-нафтол (8,6 ± 8,5) > OPD (0,62 ± 0,20) ≥ 5-ASA (0,48 ± 0,65) > гидро-
хинон (0,24 ± 0,42). В отсутствие H2O2 значения кажущихся
k
cat (мин
-1
) уменьшались
в порядке: DAB (52.1 ± 5,3) ≥ ABTS (50.5 ± 12,9) > OPD (0,25 ± 0,20). Пять остальных
веществ не являлись субстратами оксидоредуктазной активности IgG. Пероксидазная
активность иммуноглобулинов G выше оксидоредуктазной при окислении таких соеди-
нений, как DAB, ABTS и OPD в 1,3, 1,5 и 2,5 раз соответственно. Эти данные свидетель-
ствуют о возможном участии поликлональных IgG человека в качестве дополнительной
природной системы детоксификации активных форм кислорода, а так же различных
мутагенных и канцерогенных соединений.
Исследование поддержано грантом РНФ № 19-15-00145.
Всероссийская мультиконференция с международным участием «Биотехнология – медицине будущего»
29 июня - 2 июля 2019 г., г. Новосибирск, Россия
218
Do'stlaringiz bilan baham: |