Сборник содержит материалы научной мультиконференции «Биотех- нология медицине будущего»

Получение антител класса Y, нейтрализующих вирус геморрагической 
лихорадки Марбург
Полежаева О.А.
1,2
, Щербаков Д.Н.
1
, Зыбкина А.В.
1
, Солодкий В.В.
1
, Пьянков С.А.
1
, 
Пьянков О.В.
1
1
ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора, Новосибирск, Россия 
2
ФГБОУ ВО Новосибирский государственный университет, Новосибирск, Россия
Согласно международной классификации, вирус Марбург относится к семейству 
филовирусов отряд 
Mononegavirales
[1]. Вирус Марбург вызывает тяжелую геморраги-
ческую лихорадку у людей. 
Наша работа направлена на разработку эффективной схемы иммунизации кур, 
для получения разнообразия IgY антител, нейтрализующего вирус Марбург. На первом 
этапе на основе рабдовирусной системы нами были получены функциональные 
вирусоподобные частицы (ВПЧ), псевдотипированные поверхностным гликопро-
теином (GP) вируса Марбург. Функциональную активность ВПЧ определяли на клетках 
HEK293Т. Для получения нейтрализующих антител, кур иммунизировали девять раз 
с промежутком в три недели. Куры были разделены на две группы, в каждой по три 
птицы. Во время первых шести иммунизаций птицам вводили раствор, содержащий 
псевдовирусы экспонирующие на своей поверхности GP вируса Марбург без муцино-
подобного домена (штамм Popp) в концентрации 1.4x107 RLU. Во время следующих трех 
иммунизаций куриц прививали смесью лентивирусных псевдовирусов содержащие на 
своей поверхности GP вируса Марбург без муциноподобного домена (штамм DRC)
и рабдовирусных псевдовирусов, использованных для первых иммунизаций, в соотно-
шении 1:1. Первую группу животных иммунизировали смесью очищенных псевдови-
русов внутримышечно. Вторую группу иммунизировали очищенными псевдовирусами 
в комплексе с неполным адъювантом Фрейнда. Желточные антитела – IgY, выделяли 
методом изоэлектрического осаждения. Наличие вирусспецифических антител 
было подтверждено при помощи ИФА. Скрининговые исследования вируснейтрали-
зующей активности проводили при помощи псевдовирусной системы. В результате 
были получены препараты антител, нейтрализующие ВПЧ в разведении 1/254. Анализ 
нейтрализующей активности в реакции ингибирования бляшкообразования с исполь-
зованием натурального вируса Марбург штамм Popp (номер в коллекции микроорга-
низмов ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» V 626), показал наличие нейтрализующей активности 
антител в титрах от 1/8 до 1/16.
1. Sottofattori E., Anzaldi M., Mazzei M., Miele M., Balbi A., др. всего 8 человек. Synthesis 
and hybridization properties of the conjugates of oligonucleotides and stabilization agents.