Сборник содержит материалы научной мультиконференции «Биотех- нология медицине будущего»

Исследование противовирусной активности химерной формы интер-
ферона альфа-2б, слитого с аполипопротеином А-I человека
Романов В.П.
1
, Пыхтина М.Б., Беклемишев А.Б.
1
НИИ биохимии ФИЦ ФТМ, Новосибирск, Россия
Препараты рекомбинантного интерферона альфа-2б (рИФН) человека широко 
применяются в клинической практике при лечении множества заболеваний, таких как 
гепатиты В и С, некоторые виды онкологических заболеваний, иммунодефицитные 
состояния. Однако системные побочные эффекты, связанные с использованием высо- 
ких лечебных доз рИФН, ограничивают его клиническое применение. Кроме того, 
короткий период полужизни рИФН в крови снижает его эффективность и биодоступ-
ность. В этой связи, разработка биологически активного рИФН с более длительным пе- 
риодом полужизни, является актуальной задачей медицинской биотехнологии. Одним 
из способов повышения стабильности ИФН является создание химерного белка, состо-
ящего из ИФН, слитого с белком плазмы крови [1, 2]. 
Целью данной работы являлось создание гибридного белка, состоящего из ИФН, 
«сшитого» с аполипопротеином А-I (апоА-I) человека, и исследование его противови-
русной активности. АпоА-I обладает рядом ценных свойств, позволяющих улучшить 
фармакокинетику слитых с ним терапевтических белков, таких как относительно длин- 
ный период полужизни, отсутствие иммуногенности, а также способность к естест-
венному формированию липопротеиновых комплексов в организме. 
Гены ИФН и его слитой формы с апоА-I были оптимизированы, синтезированы 
и клонированы в клетках 
pichia pastoris
шт. Х33. Полученные клоны продуцировали 
и секретировали рИФН и его химерную форму в культуральную жидкость. Очистку 
рИФН осуществляли с помощью ионообменной хроматографии на смолах с SP и DEAE- 
сефарозой. Очистку химерного белка ИФН-апоА-I проводили методом обращенно-
фазовой хроматографии. Чистота полученных препаратов для рИФН и химера ИФН- 
апоА-I составила ~ 95% и ~ 90%, соответственно. Специфическую активность обеих 
форм рекомбинантного интерферона оценивали по их способности подавлять цитопати-
ческий эффект вируса везикулярного стоматита лошадей в клетках почек быка по срав- 
нению со стандартным образцом интерферона. Установлено, что мономерная и химерная 
формы интерферона имели сравнимую удельную активность в пределах 1,5-1,3×108 МЕ/мг,
что соответствует Европейской фармакопее. В дальнейшем планируется исследование 
фармакокинетических свойств полученного химерного белка ИФН-апоА-I. 
1. Huang Y.S., Chen Z., Yang Z.Y., Wang T.Y., Zhou L., др. всего 7 человек. preparation and 
characterization of a potent, long-lasting recombinant human serum albumin-interferon-
alpha2b fusion protein expressed in pichia pastoris. Eur. J. pharm. Biopharm. - 2007 -
V. 67. - Р 301–308. 
2. Ji Z.X., Chen Y.N., Zhang Y.R., Yang Y.X., Wang C.R., др. всего 6 человек. Expression of 
recombinant human IFNa-2b/IgG4 Fc fusion protein in a baculovirus insect cell system. 
Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. -2012. - V. 20. Р 617–620.

---

Всероссийская мультиконференция с международным участием «Биотехнология – медицине будущего»
29 июня - 2 июля 2019 г., г. Новосибирск, Россия
210