O‘zbekiston respublikasi sog‘liqni saqlash vazirligi toshkent farmatsevtika instituti sanoat farmatsiyasi fakulteti

Xromatografik tahlil. Xromatografiya usuli polisaxaridlarning monosaxarid tarkibini tahlil qilish uchun keng qo'llaniladi va bir necha bosqichlarni o'z ichiga oladi.
1. Xom ashyodan polisaxaridlarni ajratib olish - dorivor o'simlik materiallarini xona haroratida yoki qizdirilganda tegishli ekstraktorlar bilan ajratib olish yo'li bilan amalga oshiriladi:

• 
  suv (suvda eriydigan polisaxaridlar uchun);
  
• 
  organik yoki mineral kislotalarning suvli eritmalari (oksalat kislotasi va ammoniy oksalatning 0,5% li eritmalari aralashmasi 1:1 - pektin moddalar uchun);
  
• 
  NaOH, KOH ning suvli eritmalari (gemitsellyulozalar uchun 7–15%).
  

2.Polisaxaridlarni izolyatsiyalash - konsentrlangan ekstraktlardan polisaxaridlarni etil spirti bilan cho'ktirish orqali amalga oshiriladi:

• 
  Ekstraksiyaga nisbatan 95% etil spirtining 3 barobar miqdori yordamida suvda eriydigan polisaxaridlarni cho'ktirish;
  
• 
  pektinli moddalar uchun - ekstraksiyaga nisbatan 95% etil spirtining 5 baravari miqdori.
  

3. Polisaxaridlarning gidrolizi - polisaxaridlarni monosaxaridlarga bo'linishi uchun sulfat kislota (1 mol / l) bilan 100 ° C da 6 soat (suvda eruvchan polisaxaridlar uchun) va 24 soat (pektinli moddalar uchun) gidroliz ishlatiladi.
4. Gidrolizatlar tahlili:
a) ajratish uchun qog'oz yoki yupqa qatlamli xromtogografiya quyidagi erituvchi tizimlarda ishlatiladi:

• 
  etil asetat-piridin-suv (8:2:1 yoki 10:4:3);
  
• 
  n-butanol-benzol-piridin-suv (5:1:3:3);
  
• 
  etil asetat-sirka kislotasi-suv (18:7:8);
  
• 
  etil asetat - sirka kislotasi - chumoli kislotasi - suv (18:8:3:9 yoki 18:3:1:4);
  
• 
  n-butanol-sirka kislotasi-suv (4:1:1);
  
• 
  n-butanol-piridin-suv (6:4:3);
  

b) xromatogrammalarni aniqlash - ular ko'pincha anilingidroftalat reaktivi tomonidan amalga oshiriladi. (tarkibi: 1,66 g ftalik kislota, 100 ml to'yingan butanol eritmasida erigan 0,75 ml anilin). Xromatogrammalarni qayta ishlash, quritish va pechda 10-15 daqiqa davomida 100°C haroratda qizdirilgandan so'ng, qizil-jigarrang dog'lar mavjudligi kuzatiladi.
Inulinni xromatografik aniqlash (xom elekampan misolida) to'g'ridan-to'g'ri ekstraktda izolyatsiyasiz va gidrolizsiz amalga oshiriladi va quyidagi bosqichlarni o'z ichiga oladi: 1) qizdirilganda suv bilan ekstraktsiya qilish;
2.1) erituvchi sistemada xromatografik ajratish: 55% etil spirti;
2.2) xromatogrammalarni aniqlash: ularni timol va suyultirilgan sulfat kislotaning 20% ​​spirtli eritmasi bilan ketma-ket qayta ishlash orqali amalga oshiriladi. Havoda quritilganidan va pechda 100-105°C haroratda qizdirilgandan so'ng, xromatogrammada Rf 0,76 bo'lgan to'q sariq-qizil rangning asosiy joyi ko'rinishi kerak.