Определение общего микробного числа проводится

Определение общего микробного числа проводится:
1. Осуществляют подготовку лабораторной посуды и всех материалов.
Вся посуда стерилизуется, промывается и тщательно сушится. Стерилизация
происходит в сушильном шкафу.
После тщательного перемешивания пробы , приготавливают разбавления и вносят по 1мл воды из пробирок с разбавлениями в стерильные чашки Петри, слегка приоткрывая крышку, сразу же после внесения воды в каждую чашку вливают 5-7мл расплавленного и остуженного до +45-46⁰С питательного агара , Затем быстро смешивают содержимое чашек , равномерно распределяя по всему дну, избегая образования пузырьков воздуха, попадания агара на края и крышку чашки Петри. Смешивание производят на горизонтальной поверхности , где оставляют чашки до полного застывания.
После застывания агара , чашки с посевом помещают в термостат вверх дном и инкубируют при температуре +37⁰С в течении 24часов.
Учет результатов:
Подсчитывают все выросшие на чашке колонии, видимые при увеличении в 2-5 раз. Подсчитанное число колоний на каждой чашке делят на объем воды в мл, засеянный на те чашки, на которых велся подсчет и вычисляют среднее арифметическое. Результат выражают в числе колоний на 1мл.
Определение коли-индекса :
Объем исследуемой воды засевают в глюкозопептонную среду (ГПС). Среда ГПС применяется с поплавками или комочками ваты. На пробирках указывают номер пробы . Посевы инкубируют в термостате при температуре 37⁰С в течении 24 часов. Полное отсутствие изменения среды позволяет на данном этапе исследования дать отрицательный результат . Из среды , где отмечено помутнение и образование кислоты и газа, или только помутнение проводят высев на поверхность среды Эндо. Чашку делят на 4 сектора и делают посев с таки расчетом , чтобы получить изолированный колонии. Посевы инкубируют в термостате при температуре 37⁰С в течении 24 часов. При отсутствии роста колоний на среде Эндо дают отрицательный ответ.
При росте на Эндо характерных колоний, темно-красных, с металлическим блеском и без него, красных, розовых с красным центром, розовых и других подтверждают микрокопированием после окраски по Граму и постановкой оксидазного диска . При положительном ответе также производится высев на полужидкую среду Гисса с глюкозой и инкубируют посевы при температуре 37⁰С в течении 5-24 часов. При наличии кислоты и газа дают положительный ответ. При наличии только кислоты, пробирки оставляют на 24 часа. Расчет коли-индекса производят исходя из таблиц.