Муйдинова дилафруз дилшодбек кизи

II ГЛАВА ИСПОЛЬЗОВАННЫЕ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

При выполнении исследований были использованы: субстанция ибупрофена (ВФС – Уз 42 Уз-0232-2003), спирт этиловый ректифицированный, метиловый спирт, хлороформ, калий хлористый, кадмий хлористый, натрий фосфорнокислый однозамещенный, натрий фосфорнокислый двузамещенный, натрий хлористый, кальций хлористый, цитрат натрия, яичный желток, фосфатидилхолин (Sigma).

При проведении исследований были использованы такие оборудования, как весы электронные Ohaus Valor 3000 Xtreme V31XH202 производства фирмы «Ohaus Corporation» (США), рН-метр “Sеven Easy рН meter” IN Lab 415 производства фирмы «Mettler Toledo» (Швейцария), Спектрофотометр UV 1800 «SHUMADZU Corporation» (Япония).
2.1. Метод приготовления липосом
Липосомы были приготовлены методом механического диспергирования. Для приготовления мультиламмелярных везикул раствор фосфатидилхолина в хлороформ-этаноле (2:1) испаряли досуха в круглодонной колбе. При испарении соблюдали такие условия, чтобы фосфолипиды равномерно распределились по дну колбы. Затем высушенные ламелли фосфолипидов продували влажным азотом до тех пор, пока они не набухали и не насыщались водой. Затем в колбу осторожно добавляли раствор ибупрофена и оставляли стоять на несколько часов. И наконец, формировали липосомы путем механического диспергирования. Для этого, фосфолипиды были диспергированы стеклянными шариками. При этом образуются мультиламмелярные замкнутые везикулы. Для получения органотропных липосом, СПМ встраивали на поверхность сформированных липосом.
2.2. Определение острой токсичности
Острая токсичность изучалась на самцах белых мышей с минимальным размером группы по 6 особей грызунов. Изучение острой токсичности препаратов проводили по методу Ноакеса и Сандерсона на белых крысах обоего пола массой 140-150 г. по 6 животных в каждой группе, всего использовано 24 крыс. Изучаемый препарат «Липосомальный гель Ибупрофена» и стандартный препарат сравнения «Ибупрофен гель для наружного применения 5%» тубы 30 г производства АО Вертекс (Россия) наносили постепенно, однократно на выстриженный участок кожи спины и боков крыс размером 30 см² (4 х 7,5 см) в дозе 10 мл/кг. В первый день опыта животные находились под непрерывным наблюдением. Животных помещали в отдельные клетки, участок кожи с исследуемым веществом оставляли открытым, наблюдение вели ежечасно в день введения, 3 раза в день на 2-3 сутки и один раз в день в последующие 14 дней опыта. Учитывали общее поведение, состояние кожных покровов наличие покраснений, состояние шерсти, двигательную активность. Определяли температуру спины в кожной складке электронным термометром до нанесения испытуемого раствора и после нанесения через 6 и 12 часов в градусах Цельсия (С^о). Токсичность определяли по наличию летальности крыс.
2.3. Метод экспериментального воспаления
Оценка влияния на острое экссудативное воспаление

Метод/модификация: формалиновый отек (субплантарное введе­ние 0,1 мл 2% раствора формалина). При использовании метода «отек лапы» для изучения лекарственных форм для наружного применения препараты наносили на лапу лабораторных крыс (слегка втирая, и накла­дывают пластырь с марлей) — за 2 ч и 1 ч до индукции воспаления. Дозы исследуемого вещества при накожной аппликации или ректальном введении существенно не отличались от эффективных доз, определенных при внутрижелудочном введении.