NamDU fiziologiya va hayot faoliyati xavfsizligi kafedrasi dotsentlari
A.SHeraliev va S.Mirzaevlarning “Jismoniy madaniyat” yo’nalishi talabalari
uchun “Biokimyo ” fanidan “OQSILLARGA SIFAT VA MIQDOR
REAKSIYALAR” mavzusidagi laboratoriya mashg’uloti uchun dars
ishlanmasi
Мазкур лаборатория ишланмасида организм учун муҳим бўлган
полимер органик бирикмалардан бири оқсилларга бағишланган бўлиб,
унда оқсилларни ва аминокислотарани биологик объектларда аниқлаш
рангли реакциялари ва уларни бажариш тартиблари баён этилган
REJA:
1. Oqsillarga hos rahgli reaksiyalar
2. Aminokislotalarga hos sifat reaksiyalar
3. Oqsillarni miqdorini aniqlash
Oqsil va aminokislotalarning sifat va miqdorini aniqlashda ularda sodir
bo'ladigan rangli reaksiyalardan keng foydalaniladi. Bu reaksiyalar ikki gruppaga
bo'linib o'rganiladi. - 1. Oqsil tarkibidagi har xil ximiyaviy bog’lar borligidan
yuzaga chiqadigan rangli reaksiyalar. 2. Aminokislotalarning funksional gruppalari
bilan yuzaga chiqadigan rangli reaksiyalar.
a) BIURET REAKSIYASI
Kerakli reaktiv va asboblar: 1. Oqsil eritmasi. 2. karbamidning quruk
holdagisi. 3. 10% li natriy gidroksid eritmasi. 4. 1 % li mis sulfat eritmasi. 5.
Probirkalar. 6. Pipetkalar. 7. Shtativ. 8. Elektr plitka yoki gaz gorelka.
Oqsil eritmasi ishqoriy muhitda mis sulfat ionlari bilan pushti-binafsha yoki
ko'k-binafsha rang beradi. Rangning hosil bo'lishi, oqsil molekulasidagi peptid
bog'larining mis ionlari bilan hosil qiladigan kompleksiga bog'liq.
Biuret reaksiyasini oqsilning to'la parchalanmasligi natijasida hosil bo'ladigan
pepton va polipeptidlar ham beradi. Bunday rangli reaksiyani karbamid
(mochevina) ni qizdirgan paytda hosil bo'ladigan biuret ham beradi. Reaksiya
quyidagi tenglamaga muzofiq boradi:
Karbamid
Biuret
Biuret reaksiyasi paytida hosil bo'ladigan kompleksning rangi peptid
zanjirining uzunligiga qarab har xil bo'lishi mumkin. Masalan, to'rtta aminokislota
qoldig'idan iborat polipeptid beradigan kompleks qizil, tripeptid-binafsha rang va,
nihoyat, dipeptid ko'k rang beradi.
Biuret reaksiyasini o'z molekulasida — CS — NH — yoki — CH — NH —
guruhi bo'lgan birikmalar va shuningdek, aminokislotalardan gistidin, amidlardan
asparagin ham beradi. Biuret reaksiyasining rangi eritmadagi mis ionlari miqdoriga
qarab o'zgaradi, ya'ni mis sulfat eritmasi ko'proq qo'shilsa ko'k rang, kamroq
qo'shilsa pushti rang hosil bo'ladi.
Ishning bajarilishi. Ishni bajarish uchun yaxshi yuvilib quritilgan probirkaga
karbamid kukunidan ozroq solib, elektr yoki gaz plitkada qizdiriladi. Qizdirish
natijasida karbamid suyuq holatga o'tadi. Agar qizdirishni davom ettirsak, u yana
qotadi. Karbamidning qattiq holatga o'tishi bilan qizdirish to'xtatiladi.
Karbamidning qizdirilish paytida biuret hosil bo'ladi, ammiak esa havoga chiqib
ketadi. Ammiakning chiqishini uning hididan bilish mumkin.
Probirka sovigach, unga 1 ml natriy gidroksid eritmasi solib chayqatiladi va
1—2 tomchi mis sulfat eritmasidan tomizilib aralashtiriladi. Natijada probirkadagi
eritma pushti rangga o'tadi. Mis sulfatni qo'shishda ehtiyot bo'lish kerak. Agar
undan ko'proq qo'shilsa, eritma ko'k-havo rangga o'tib ketishi mumkin.
Bu ishni o'simlik oqsili bilan ham olib borish mumkin. Buning uchun
probirkaga o'simlik oqsilidan solib, uning ustiga 1 ml natriy gidroksid eritmasi
tomizib chayqatiladi. So'ngra 1—2 tomchi mis sulfat qo'shib, eritma asta-sekin
aralashtiriladi. Probirkada binafsha rang hosil bo'ladi.
Olingan natijalar asosida zaruriy xulosa chiqariladi.