Мавзу. Геномнинг ДНК даражасидаги таҳлили

6. мавзу. Геномнинг ДНК даражасидаги таҳлили.

Режа:

1. 
   Геном ДНК сини ажратиш
   
2. 
   Полимераза занжир реакцияси
   
3. 
   Гель-электрофорез методи
   

Геномнинг ДНК даражасидаги таҳлили 3 босқичга бўлинади:

• 
  Объектни танлаш
  
• 
  Танланган объектга мос методни танлаш
  
• 
  Натижаларни 3 такрорий тажриба асосида хулосалаш
  

ДНК таҳлили қўлланиладиган соҳалар

• 
  Ўсимликлар ва ҳайвонлар систематикаси
  
• 
  Тиббиётда (патоген микроорганизмлар зарарини камайтириш)
  
• 
  Тиббий диагностика (ташхис қўйиш)
  
• 
  Суд экспертизада
  
• 
  Криминалистикада
  
• 
  Иденфикацияланиш (шахсни аниқлаш)
  
• 
  Археология, палеонтология ва этногенетика
  

ДНК ажратиб олишнинг бир неча усуллари мавжуд:

• 
  1. Фенол-хлороформли усул
  
• 
  2. СТАБ усули
  
• 
  3. Силикагелли усул
  
• 
  GuSCN + SiO₂ li metod yordamida DNK ni ajratib olish.
  

Sorbsiyali ekstraksiya- silikagel sirtida xaotrop tuzlar ishtirokida tanlab sorbsiyalashga asoslangan usuldir. Ingibitorlar va klinik namunaning boshqa komponentlari eritmada qoladi. Sentrifugalash natijasida silikagel va nuklein kislota cho‘kmaga tushadi, PZR ingibitorlarini tutgan supernatant esa to‘kib tashlanadi. Bir necha marta yuvish jarayonlari esa yuqori tozalikka ega DNK molekulasini ajratib olishga imkon beradi. Nuklein kislotalar ekstraksiyasida dastlabki bosqichlardan biri biologik materialni lizisga uchratishdir.

СТАВ усули. Бу усулни қўллаб ўсимлик тўқимасидан геном ДНКси ажратиш анчагина самарали ва сифатлидир. Бу усулда барча ўсимлик турларидан ДНК ажратиш мумкин бўлиб, ишлатилаётган реагентлар инсон саломатлиги учун хавфсиз ва бошқа усулларга қараганда арзон ҳисобланади. Бир неча босқичда амалга оширилади:

•