К 70-летию академика юнусова марата сабировича

РАЗРАБОТКА ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ СКРИНИНГА
ХИМИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ-КАНДИДАТОВ В ЛЕКАРСТВА 
 
С.В. Садовников, Л.Ф. Файзуллина, Ю.В. Вахитова, Р.С. Ямиданов, В.А. Вахитов
 
Институт биохимии и генетики УНЦ РАН, Уфа, пр-т Октября, 71 
[e-mail] 
В настоящее время на начальных этапах доклинических исследований широко приме-
няются так называемые in vitro системы высокопроизводительного скрининга лекарственных 
веществ, основанные на клеточных технологиях. Данные клеточные тест-системы позволяют 
проводить первичную оценку фармакологических эффектов скринируемых соединений по 
изменению определенных параметров клеточного метаболизма. При этом особое внимание 
уделяется разработке клеточных тест-системы, позволяющих проводить экспресс-оценку по-
тенциальной токсичности лекарственного вещества. 
В лаборатории молекулярной фармакологии и иммунологии ИБГ УНЦ РАН создана по-
добная in vitro тест-система. Принцип предлагаемой тест-системы основан на детекции фе-
нотипических и метаболических изменений основных клеточных маркеров, сопряженных с 
цитотоксичностью при действии исследуемых лекарственных препаратов в культуре клеток 
в формате 96-ти луночных планшет. Для оценки цитотоксичности используются клеточные 
линии HEK293T, HepG2, Jurkat,а также культуры мононуклеаров. Предполагается оценивать 
воздействие лекарственных веществ на следующие параметры цитотоксичности: выживае-
мость клеток, апоптоз, пролиферативный ответ, прогрессию клеточного цикла, анализ про-
теасом-убиквитиновой системы и функционального состояния стрессовых и провоспали-
тельных белков, характеристика про- и антиоксидантных систем клетки, кальциевый гомео-
стаз, изменения мембранного потенциала митохондрий, целостность цитоскелета. Визуали-
зация и детекция биомаркеров проводится с использованием проточной цитофлюорометрии, 
флюоресцентной и конфокальной микроскопии, а также рутинными и доступными биохими-
ческими методами. Математическая обработка полученных данных включает расчет кон-
стантных величин, характеризующих токсичность вещества (IC
50
, ED
50
). 
Основным преимуществом предлагаемого подхода к экспресс-оценке потенциальной 
токсичности лекарственных веществ является возможность гибко видоизменять тест-
систему. В частности, в зависимости от типа используемой клеточной линии возможна оцен-
ка токсичность в отношении того или иного типа ткани (органотропность – кардиотоксич-
ность, гепатотоксичность, токсичность в отношении клеток крови). Кроме того, относитель-
ное снижение стоимости затрат на проведение токсикологических in vitro анализов достига-
ется за счет миниатюризации тест-системы. Таким образом, предложен комплексный под-
ход, позволяющий проводить всестороннюю и объективную оценку общей и тканеспеци-
фичной цитотоксичности фармакологических веществ на ранних этапах их разработки в ка-
честве лекарств.