Ingeneriyasi

Gel xramotografiya usuli 
Preparativ  enzimologiyada  chidamli  bo„lmagan  fermentlarni  «yumshoq» 
(past haroratli) sharoitlarda ajratishdan ko„p foydalaniladi, ya‟ni bunda ferment 
butun tozalash jarayoni davomida eritma holida bo„ladi. Bu usullar orasida eng 
keng tarqalgani gelfiltrasiya, elektroforez, izoelektrik fokuslash va boshqalardir.  
Ferment  preparatlari  texnologiyasida  eng  139rga  amaliy  ahamiyatga  ega 
bo„lgani  –  gelfiltrasiyadir.  “Gelfiltrasiya”  jumlasi  ancha  qo„polroq,  lekin  u 
ilmiy    adabiyotda  juda  keng  tarqalgan.  Bu  jarayonni  amalga  oshirish  uchun 
destran  asosida  olingan  gellardan  foydalaniladi  va  ular  yordamida  o„lchamiga 
qarab har xil makromolekulalarni tez ajratish mumkin.  
Gel  ochiq  holdagi  ko„ndalang  tikilgan  uch  o„lchamli  molekula  turi  bo„lib, 
kolonkalarni  oson  to„ldirish  uchun  yumaloq  donachalar  (granula)  ko„rinishida 

---

 
140 
bo„ladi.  Donachalarda  kichik  teshikchalari  bo„lib  ularga  faqat  juda  kichik 
molekulali birikmalar kirib, yirik molekulalar esa kirmaydi. Bu usul gellarning 
aynan ana shu xususiyatiga asoslangandir. 
Bu  usul    fermentlarni    tozalash    va  ajratishda  nafaqat  laboratoriya,  balki 
sanoat  miqyosida  ham  qo„llaniladi.  Gelfiltrasiya    uchun  ko„ndalang  tikilgan 
dekstran  (sefadekslar  va  sefakrillar)  gellaridan,  ko„ndalang  tikilgan 
poliakrilamid  gellaridan  (biogellar),  akrilamid  polimer  zanjiri  yopishtirilgan 
agaroza    gellardan  (ultragellar)  va  boshqa  qattiq  ko„ndalang  tikilgan  (SL-
sefarozalar va S-sefakrillar) agaroza gellardan foydalaniladi. Kolonkada ferment 
eritmasining  bir  qismi  gel  donachalar  orasida  va  bir  qismi  esa  donachalarning 
teshikchalari ichida joylashadi.  
Gelfiltrasiya  –  bu  tarqaluvchan  xromatografiyaning  bir  shakli  bo„lib, 
eritilgan  moddalar  eritmaning  bir    muncha  yuzada  joylashgan  harakatchan  va 
ichki  tomonida  joylashgan  kam  harakatli  qismlarida  tarqalgan  bo„ladi. 
Kolonkada  eritilgan  moddaning  ushlab  qolinish  darajasi  uning  gel 
teshikchalariga  kira  olish  qobiliyatiga  bog‟liqdir.    Shuningdek,  gelfiltrasiya 
jarayonida kolonkadan  avval yuqori molekulali  moddalar va keyin esa kichik 
molekulalilari birin-ketin chiqa boshlaydi, bunda gel molekulyar to„r vazifasini 
bajaradi. Bu jarayon mukammal ravishda olib borilishi uchun, gel tayyorlangan 
material erigan birikmalar ta‟siriga juda ham inert bo„lishi kerak.  
Afsuski  bugungi  kunda  ishlatilayotgan  barcha  140rgani  inert  emas 
140rgan‟zan  ma‟lum  pH  ko„rsatkichida  ular  so„rish  qobiliyatini  namoyon 
qilishi  mumkin.  Masalan,  shunday  gellarga  sefakrillarni    kiritish    mumkin.  
Gelfiltrasiya usuli bilan mayda gel donachalarida yuqori bosim ostida juda ko„p 
har  xil  moddalarning,  shu  jumladan  oqsillarning    aralashmalari  ajratilmoqda.  
Bu  yangi  yuqori  bosim  ostida  suyuq  xromatografiya  uslubi  qisqa  vaqt  ichida 
yuqori  darajali  ajratish  imkonini  beradi  va  u  fermentlarni  tozalashning  oxirgi 
bosqichlarida juda ham unumlidir. 

---

 
141