|
Материалы конференции «Современные проблемы генетики, геномики и биотехнологии», 18 мая 2016г.
149
ҒЎЗАНИ ФУЗАРИОЗ ВИЛТ
(Fusarium oxysporum f.sp. vasinfectum)
КАСАЛЛИГИГА ЧИДАМЛИ БИОТЕХНОЛОГИК ЛИНИЯЛАРИНИ
ОЛИШ
Буриев З.Т., Убайдуллаева Х.А., Бабаджанова Ф.И., Резаева Б.Р.,
Рузибаев Х.С., Норов Т.М., Абдурахмoнов И.Ю.
ЎзР ФА Геномика ва биоинформатика маркази
111215, Ўзбекистон Республикаси, Тошкент вил., Қибрай тум, Университет кўча, 2-уй
zabardast.buriev@genomics.uz
Ўзбекистон шароитида қишлоқ хўжалик экинларининг ҳосилдорлигини
камайтирувчи омиллардан бири фузариоз касаллигидир. Дунёнинг барча
мамлакатларида касалликка
чидамли
навлар
яратилиб
амалиётда
қўлланилгунга қадар фузариоз сўлиш касаллиги ғўзанинг ингичка толали
навларида ҳосилдорликни кескин камайтирувчи асосий факторлардан бири
бўлгани маълум. Ғўзада фузариоз сўлиш (фузариоз вилт)ни
Fusarium
oxysporum f. sp. vasinfectum
ва замбуруғлар қўзғатади.
Fusarium oxysporum f.
vasinfectum
ғўзанинг бир нечта турини, жумладан, дарахтсимон
(Gossypium
arboreum),
ингичка толали Миср ёки Перу
(G.barbadense; G.peruvianum),
ўтсимон ёки оддий (
G. herbaceum)
ва ўрта толали
(G.hirsutum)
ғўзани
зарарлай олади. Ўсимлик ўтказувчи тўқималари мицелий билан тўлиб,
тиқилиб қолиши ҳамда замбуруғ метоболитлари ўсимликни заҳарлаши
сўлиш сабаблари ҳисобланади. Шу сабабдан, олимлар томонидан қишлоқ
хўжалик экинларини мукамаллаштирилган навларини яратилишига катта
аҳамият берилмоқда. Жумладан, ғўзани вирусли ва замбуруғли
касалликларга чидамли навларини яратишда замонавий биотехнологик
усуллардан фойдаланган ҳолда амалга ошириш муҳим вазифалардан бири
ҳисобланади.
Шу мақсадда Геномика ва биоинформатика марказида
Fusarium
oxysporum
(FOV) замбруғини онтогенезида қатнашувчи бир нечта генлари
асосида ген-нокаут конструкциялари тузилган. Бу конструкциялардан бири
FoSTUA
гени бўлиб, маҳаллий расадаги FOV геномидан ажратиб олинган
Материалы конференции «Современные проблемы генетики, геномики и биотехнологии», 18 мая 2016г.
150
бўлиб, микро ва макро конидий генларини бошқаради (Ohara et al., 2004).
Бундан ташқари шу лойиҳа доирасида маҳаллий расадаги FOV геномидан
бикаверинлар, фумонизинлар, фузиариоз кислотаси ва фузаринлар каби
патогенларнинг қатор иккиламчи метаболитлари синтезини тартибга солувчи
Lae
1 (Ohara et al., 2004) генларидан фойдаланилади. Ушбу генлар ёки
уларнинг бўлаги нишон-генларнинг РНК-интерференциясини келтириб
чиқарувчи бинар вектор конструкциясини тузиш учун номзод кетма-кетлик
сифатида танланган бўлиб, бу билан мазкур генларнинг функциясини
пасайтиради. Ушбу генлар учун илк изланишлар доирасида қатор RNAi
вектор конструкциялари олинди. Шундан келиб чиқиб тадқиқотларимизнинг
асосий мақсади РНК интерференцияси (RNAi) орқали
Fusarium oxysporum
f.
sp.vasinfectum
касаллигига чидамли ғўза линияларини олишдан иборатдир.
Илмий тадқиқотлар натижасида,
pHG8-FoSTUA
ва
pHG8-LAE1
RNAi
векторлари рифампицин ва спектиномицин селектив антибиотиклар муҳитда
ўстирилди ва Кокер-312 ғўза ўсимлиги гипокотилига LBA 4404 штаммли
агробактерия
ёрдамида
трансформация
қилинди.
Трансформация
натижаларига
кўра
pHG8-FoSTUA
вектор
конструкцияси
билан
трансформация қилинган ғўза гипокотиллари канамицинли селектив озуқа
муҳитда назоратга нисбатан 72% каллус тўқималари ҳосил қилган. pHG8-
LAE1 вектор конструкцияси билан трансформация қилинган ғўза
гипокотиллари канамицинли селектив озуқа муҳитда назоратга нисбатан 66%
каллус тўқималари индукция бўлган.
Ҳозирги кунда
pHG8-FoSTUA
ва
pHG8-LAE1
вектор конструкцияси
билан трансформация қилинган регенерант ўсимликлар олинди. Натижада
ўзида
pHG8-FoSTUA
ва
pHG8-LAE1
вектор конструкцияси тутган
ўсимликларни бир қисми
in vitro
шароитида ва бир қисми фитотронда
тупроққа ўтказилди. Ушбу ўсимликларни барг тўқимасидан ДНК намуналари
ажратилиб, ген-специфик ДНК-маркерлари ёрдамида ПЗР реакцияси қўйилди
ва молекуляр таҳлил қилинди.
Материалы конференции «Современные проблемы генетики, геномики и биотехнологии», 18 мая 2016г.
151
Do'stlaringiz bilan baham: |
