Fotometrik usul

3. FOTOMETRIK USUL
3.1. Usul mohiyati

Usul S vitaminini metafosfor kislotasi yoki sirka va metafosfor kislotalari aralashmasi bilan ekstraksiyalashga, natriy 2,6-dixlorfenolindofenolatni askorbin kislota bilan qaytarishga, so'ngra organik erituvchi (amil asetat, butil asetat yoki ksilen) bilan ekstraktsiyaga asoslangan. ) ortiqcha natriy 2,6-diklorfenolindofenolat va 500 nm to'lqin uzunligida organik ekstraktning fotometriyasi.

3.2. Uskunalar, materiallar va reaktivlar

Uskunalar, materiallar va reagentlar - 2.2-bandga muvofiq quyidagi qo'shimcha bilan.

Laboratoriya santrifugasi, 2000 rpm  , tuproqli tiqinlar bilan 25 ml santrifüj naychalari bilan  .

Fotoelektrik laboratoriya kolorimetri yoki spektrofotometr, (500 ± 10) nm to'lqin uzunligida optik zichlikni o'lchashni ta'minlaydi .


GOST 25336 bo'yicha 50 sm3 sig'imli shisha hunilarni ajratish  .

Yupqa bo'laklarda distillash uchun qurilma.

Sirka kislotasi amil esteri (amil asetat).

GOST 22300 bo'yicha butil sirka kislotasi esteri (butil asetat) .

Gidrokinon, asetondagi yarim to'yingan eritma.

Ksilol.

3.3. Sinovga tayyorgarlik

3.3.1. 2.3-bandga muvofiq eritmalarni quyidagi qo'shimcha bilan tayyorlash

3.3.1.1. Gidrokinonning yarim to'yingan eritmasini tayyorlash.

Avval gidroxinonning asetondagi to'yingan eritmasini tayyorlang. Buning uchun 1 g gidroxinon 10 ml  asetonda eritiladi va filtrlanadi. Bir hajm to‘yingan eritmani bir xil hajmdagi aseton bilan aralashtirish orqali gidroxinonning yarim to‘yingan eritmasi tayyorlanadi.

3.3.1.2. Organik erituvchida oksidlovchi moddalar bo'lmasligi kerak. Uning tozaligi quyidagicha tekshiriladi:  avval 1 sm3 natriy 2,6-diklorfenolindofenolat eritmasiga askorbin kislota eritmasi rangi o‘zgarib ketguncha qo‘shiladi, so‘ngra 10 sm3  erituvchi qo‘shiladi, chayqatiladi va 10 daqiqaga qoldiriladi. Agar organik qatlam rangli bo'lsa, uni distillash orqali tozalash kerak, mos ravishda haroratda distillangan fraktsiyani yig'ish kerak: amil asetat - 149 ° C da, butil asetat - 126 ° C da, ksilen - 137-141 ° S da.

Sinovdan keyin ishlatiladigan organik erituvchi yuqoridagi kabi distillash orqali tozalanadi.

Organik erituvchi bilan barcha ishlar tutun qopqog'ida amalga oshirilishi kerak.

3.3.2. Kalibrlash grafigini qurish

Kalibrlash egri chizig'ini qurish uchun beshta yechim tayyorlanadi. Buning uchun santrifüj naychalarida yoki ajratuvchi voronkalarda: birinchisida - 5,0 ml  kislotalarning ekstraktsiya eritmasidan, qolganlarida ketma-ket 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 ml  natriy 2,6-diklorfenolindofenolat eritmasi va ekstraksiya eritmasini 5,0 ml hajmgacha qo'shing  . Barcha naychalarga yoki ajratuvchi voronkalarga 5  ml asetat bufer eritmasidan soling, aralashtiring va keyin 10 ml  organik erituvchi qo'shing.

Naychalarni yoki ajratuvchi voronkalarni to'xtating va tarkibini 10 soniya davomida aralashtiring. Naychalar santrifüjlanadi va hunilar qatlamlar ajratilguncha yolg'iz qoladi. Organik qatlam ishchi yuzalar orasidagi masofa 10 mm bo'lgan kyuvetaga o'tkaziladi va uning optik zichligi 500 nm to'lqin uzunligida o'lchanadi. Nazorat mos yozuvlar eritmasi sifatida sof erituvchi ishlatiladi.

Olingan ma'lumotlar asosida natriy 2,6-diklorfenolindofenolatning organik ekstrakti optik zichligining kub santimetrdagi natriy 2,6-diklorfenolindofenolat eritmasi hajmiga bog'liqligi grafigi tuziladi.

Kalibrlash grafigini qurish natriy 2,6-diklorfenolindofenolatning har bir yangi tayyorlangan eritmasi uchun amalga oshiriladi.