Fermentlarni tozalash usullari

Очистка и характеристика внутриклеточных и внеклеточных α-глюкозидаз из штамма Geobacillus toebii E134
Арзу Колери Джихан ¹, Мехлика Бенли , Cumhur Cokmus
Принадлежности расширять

• 
  PMID: 22028281
  

• 
  DOI: 10.1002 / cbf.1820
  

Абстрактный
Два различных термофильных штамма E134, продуцирующих α-глюкозидазу, были выделены из горячего источника в Козаклы, Турция. На основании фенотипических, филогенетических и хемотаксономических данных штамм был предложен как вид G. toebii. Его термостабильные экзо-α-1,4-глюкозидазы также были охарактеризованы и сравнены, которые были очищены от внутриклеточных и внеклеточных фракций с расчетными молекулярными массами 65 и 45 кДа. Внутриклеточные и внеклеточные α-глюкозидазы показали оптимальную активность при 65 ° C, pH 7,0 и при 70 ° C, pH 6,8, со значениями 3,65 и 0,83 K (м) для субстрата pNPG, соответственно. Оба фермента оставались активными в диапазоне температур и pH 35-70 ° C и 4,5-11,0. Они сохранили 82 и 84% своей активности при инкубации при 60 ° C в течение 5 часов. Их относительная активность составляла 45-75% и 45-60% при pH 4. 5 и 11,0 за 15 ч при 35 ° C. Они могли гидролизовать связи α-1,3 и α-1,4 на субстратах в дополнение к высокой активности трансгликозилирования, хотя внутриклеточный фермент имел большее сродство к субстратам как в реакциях гидролиза, так и в реакциях трансгликозилирования. Более того, хотя додецилсульфат натрия действовал как активатор для них обоих при 60 ° C, мочевина и этанол только увеличивали активность внеклеточной α-глюкозидазы. В рамках этого исследования был представлен штамм G. toebii E134, который может иметь потенциал в биотехнологических процессах, если учитывать конформационную стабильность его ферментов к нагреванию, pH и денатурантам. хотя внутриклеточный фермент имел большее сродство к субстратам как в реакциях гидролиза, так и в реакциях трансгликозилирования. Более того, хотя додецилсульфат натрия действовал как активатор для них обоих при 60 ° C, мочевина и этанол только увеличивали активность внеклеточной α-глюкозидазы. В рамках этого исследования был представлен штамм G. toebii E134, который может иметь потенциал в биотехнологических процессах, если учитывать конформационную стабильность его ферментов к нагреванию, pH и денатурантам. хотя внутриклеточный фермент имел большее сродство к субстратам как в реакциях гидролиза, так и в реакциях трансгликозилирования. Более того, хотя додецилсульфат натрия действовал как активатор для них обоих при 60 ° C, мочевина и этанол только увеличивали активность внеклеточной α-глюкозидазы. В рамках этого исследования был представлен штамм G. toebii E134, который может иметь потенциал в биотехнологических процессах, если учитывать конформационную стабильность его ферментов к нагреванию, pH и денатурантам.