Copper metallurgical slags: mineralogy, bio/weathering processes and metal bioleaching

3.1.3.4.2  Bioleaching with P. fluorescens 
The  experimental  approach  included:  i)  biotic  treatment  of  slags  in  the  presence  of  P. 
fluorescens bacteria (GMB) and ii) abiotic treatment with sterile growth medium (GM).  The 
growth medium used in this experiment consists of succinic acid (4 g), ammonium sulfate (1 
g), disodium hydrogen phosphate (0.2 g) and Tris buffer (6 g) per 1 L of ultrapure water (Yin 
et  al.,  2014).  Two  percent  (v/v)  of  pre-grown  bacterial  culture  (described  above)  was 
inoculated to the bioleaching reactors. The initial pH of the medium was adjusted to 7.0 using 
5 M NaOH. The experiments were carried out for 40 days, whereas the sampling times were 
fixed at 3, 7, 14, 21, 30 and 40 days. During each sampling time, 10 mL of supernatant was 
collected  for  elemental  analysis  and  the  amount  of  leachate  sampled  was  replaced  by  the 
respective volume equivalent of fresh medium. At the end of each experiment, biomass from 
batch  incubations  was  plated  on  agar  plates  (composed  of  plate  counting  agar)  at  aerobic 

---

CHAPTER 3: MATERIALS AND METHODS
 
 
94 
 
conditions at 30
°C and observed by naked eye with respect to bacterial type purity in order to 
ensure that no cross contamination in the batch experiments occurred. 
 
 
 
FIGURE 3.11 Schematic picture presenting experimental design for bioleaching experiments. 
 
 

---

CHAPTER 3: MATERIALS AND METHODS
 
 
95 
 

---

 
96