Bioorganik kimyo

I. Oqsillarni tabiiy manbalar (sut, tuxum, qon zardobi)dan ajratib olish
2-ish

Sigir sutidan kazeinni ajratish
Ishning umumiy izoshi. Sutning pH-ini kazeinning izoelektrik nuqtasigacha (4,5-4,7) etkazib kazein cho`ktiriladi va organik erituvchilar bilan yog`sizlantiriladi.

Jihozlar va reaktivlar. 0,5 l o`lchagich stakan, sentrifuga (vakuum-filtrlagich qurilmasi), pH-metr, suvsiz sirka kislotasi, etil spirti (100 ml), efir (100 ml), pH 8,5 ga teng bo`lgan 500 mol natriy karbonat bufer eritmasi, sut (300 ml).

Ishning borishi. Bu uslub oqsillarning o`z izoelektrik nuktasidagi eruvchanligining juda kam bo`lishiga asoslangan. Oqsillar kontsentrlangan eritmalardan o`z izoelektrik nuqtalarida cho`kmaga tushadilar. 300 ml sutni aralashtirib turilgan sholda 0,5 M CH₃COOH qo`shilib (tomchilab) achitiladi. Bunda mushit pH-metr yordamida tekshirib turiladi, pH 4,5 gacha etkaziladi va achitilgan sut cho`kma shosil qilishligi uchun 1 soat (xolodil’nikda) qoldiriladi. pH ning 4,5 dan kamaymasligiga xarakat qilish kerak, chunki pH ko`rsatkichi kislotaliroq bo`lsa kazein erib ketadi. Kazein cho`kmasi sentrifugalanib yoki filtrlanib ajratiladi.

Kazein cho`kmasiga teng shajmda spirt qo`shilib aralashtiriladi va spirt filtralanib (sentrifugalanib) ajratiladi. Ushbu jarayon yana bir martaba qaytariladi.

Spirt bilan suvsizlantirilgan kazein cho`kmasini yog`ini ajratish uchun uch martaba 50 ml dan efir bilan ishlanadi. Tamoman yog`sizlantirilgan kazein shavoda quritiladi va pH 8,5 ga teng bo`lgan 100-150 ml 50 mmol’ natriy karbonat eritmasida eritiladi. Kazein eritmasi sentrifugalash yoki filtrlash bilan tindiriladi. eritma tiniq bo`lishi kerak. Kazein yuqorida yozilganidek tindirish uchun ikkinchi marotaba cho`ktiriladi. +ayta cho`ktirilgan kazein filtr qog`ozlari orasida siqiladi va quritiladi, iloji boricha quritish oldidan ishlovni yuqorida aytilganidek spirt va efir bilan qaytarish kerak. +uritilgan kazein tortiladi va unumi tajribaga olingan sut miqdoriga nisbatan aniqlanadi.
Adabiyotlar: Filippovich YU.B. i dr. Praktikum po obshey bioximii. M., 1975, 39 s.