Biokimyo va molekulyar biologiya

Dializatorni tayyorlash. Sellofan 9-12 sm diametrli doira kesib olinadi. Uni xalta shaklida bukiladi. Hosil bo’lgan xaltacha shisha tayoqchaga boylanadi va stakanga tagi tegmaydigan qilib osiladi. Kichkina voronka yordamida dializatorga 10 ml tuzli aralashmaning filtratidan solinadi (solingan suyuqlik xaltachaning yarmidan oshmasligi kerak) va 1 litrli distillangan suv solingan stakanga joylashtiriladi. Shunadn keyin har 5-10 minut davomida stakandagi suvdan olib, unga sulfat ionlarini borligini (bariy gidroksid yordamida) va oqsilni yo’qligiga (biuret reaksiyasi yordamida) tekshirish uchun reaksiyalar o’tkaziladi. Stakandagi suv almashtirilgandan keyin yanashu reaksiyalar qilib ko’riladi. Agar reaksiya chiqsa, stakandagi suv 5-10 minut davomida almashtirilib, reaksiya chiqmaguncha amalgam oshiriladi.

1,5-2 soatdan keyin sulfat ionlari uchun olib borilgan reaksiya chiqmaydi. Bu dialilzning tugaganlihidan darak beradi, ya’ni bunda dializatordagi tuz to’liq stakandagisuvga chiqib ketgan bo’ladi. Shu paytda xaltachadagi tiniq bo’lgan filtrate loyqalanadi. Natijada distillangan suvda eriydigan globulinlar cho’kmaga tushadi.

Xaltacha stakandan olinadi va uning ichidagisi qog’oz filtr orqali filtrlanadi. Filtrda globulinlar qoladi, albuminlar esa filtratga o’tadi. Ikkala tomonda ham oqsil borligi biuret reaksiyasi yordamida aniqlanadi.

Albuminlarni cho’ktirish uchun filtratga ammoniy sulfatning kukunidan eritma to’yingan holga kelguncha solinadi. Bunday sharoitda albuminlar cho’kmaga tushadi. Keyin quruq qog’oz filt yordamida filtrlanadi. Ammoniy sulfat bilan to’liq to’yintirilganda, eritmada oqsil qolmaydi. Buni tekshirish uchun filtratdan ozgina olib biuret reaksiyasini o’tkazib ko’rish kerak.