Bakteriofaglar, antibiotiklar, mikroorganizimlarni infeksiyadan saqlanishda normal mikrofloraning ahamiyati

Tajriba o‘tkazish texnikasi. 20—25 ml GPA quyilgan Petri kosachalaridagi agarga steril qog‘oz qo‘yilib, termostatda yokibakte- riotsid lampa (lampa oralig‘i 2 m bo‘lishi lozim) ostida quritish uchun qo‘yiladi. Titrlanayotgan fagni 10' dan 10 '^i: gacha (yuqorida bayon etilgandek) suyultirib chiqiladi. Buning uchun barcha probirkalarga 2,5 ml.dan eritilgan va 45°C gacha sovitilgan GPA quyiladi va birinchi probirkaga fag solinib aralashtirib chiqiladi, 10-dan olib dezinfeksiya­lovchi moddaga to‘kiladi. O‘ntaprobirkamizningbarchasiga0,l ml.dan test kultura solamiz. Probirka ichidagilar qotib qolmasidan oziqa muhit quyiladi va tartib raqami qo‘yilgan Petri kosachalariga quyib chiqamiz (1-probirkadan 1-kosachadagi agarga, 2 dan 2-kosachaga va hokazo). Kosachalami termostatda 30 daqiqaga qoldiramiz.
Natija 18—20 soatdan keyin o‘qiladi. Fag katta konsentratsiyada bo‘lganligi sababli (birinchi kosachalarda), qo‘shilib ketgan kulturaning lizisi yuzaga keladi. Fag miqdori kam bo‘lgan suyultirish darajalaridagi kosachalarda sanay oladigan alohida lizis koloniyalari hosil bo‘ladi. Sanalganda adashib ketmaslik uchun kosachaning orqa tomonidan lizis koloniyalar belgilanib chiqiladi. Koloniyani sanaydigan asbob ishni yengillashtiradi. 1 ml fagolizatda faglar miqdorini aniqlash uchun quyidagi formuladan foydalaniladi:
n=y—x—x,
bu yerda: n — qidirilayotgan son (faglarning miqdori); у — kosa- chada hosil bo‘lgan lizis koloniyalar soni; x — kosachadagi fagning suyultirish darajasi.
Masalan, 10 ~⁸ kosachamizda (1:10 • 8) 25 ta lizis koloniya hosil bo‘lgan. 1 ml tekshirilayotgan suyuqlikda 25 • 10 fag mavjud. Bir qancha suyultirish darajalaridagi faglarning miqdori aniqlanib, o‘r- tacha arifmetik ko‘rsatkichi hisoblab chiqilganda, to‘g‘ri natijaga erishish mumkin.
Faglarai ajratish usullari
Fag tekshirilayotgan material filtratida fag aniqlanadi va o‘rganiladi. Fagning borligi va faolligini fagga sezgir mos kulturaning lizisga uchrashidan aniqlash mumkin.
Filtratda kam miqdorda fag bo‘lganligi sababli, bu usul ishonchli natijani bermaydi. Faglarning miqdorini oshirish uchun boyitish usulidan foydalaniladi.