6. Kolonkali suyuqlik xromatografiyasi.
Xromatografiya
moddalarni ajratish, konsentrlash va tahlil qilish usullaridan bin
bo‘lib, ularning o'zaro aralashmaydigan ikki faza (turg‘un va harakatchan) orasida
turlicha taqsimlanishiga asoslangan. Turg'un fazaning
sirti bilan tutashganda
aralashma tarkibidagi moddalar o ‘z adsorbilanishi va erish xususiyatlariga mos
ravishda turg'un va harakatchan fazalar orasida tarqaladi.
Natijada dinamik
(harakatchan) muvozanat yuzaga keladi va ajratiladigan aralashma tarkibidagi
molekulalar yoki bu fazada tarqalib turadi. Xromatografik sistema bo'ylab
faqat
turg'un fazada bo'lgan molekulalar harakatlanadi. Turli moddalar bu fazalarga
turhcha munosabatda bo'ladi. Turg'un faza bilan kuchliroq ta’sirlashadigan modda
xromatografik sistema bo'ylab sekin harakatlanadi. Turli
xil moddalarni ajratish
uchun turg'un faza hech bo‘lmaganda quyidagi to'rt xossadan biriga ega bo'lishi
kerak: 1) harakatchan fazada bo'lgan moddalarni fizikaviy yuta olish; 2) harakatchan
fazadagi moddalarni kimyoviy yuta olish; 3) ajratiladigan moddalarni erita olish; 4)
g'ovak tuzilishga ega bo'lish va shu asosda bir moddani ikkinchisidan o'lchamlari
farqi asosida ajratish.
Xromatografiya usuli 1903-yilda rus botanigi M.S.Svet tomonidan tavsiya qilingan.
Usulning klassik variantida diametri 0,5-5 sm, uzunligi 20-100 sm bo ‘Igan shisha
naydan iborat sorbent (turg'un faza) bilan to'ldirilgan kolonkadan elyuyent
(harakatchan faza) o‘tkaziladi. Sorbent og'irlik kuchi ta’sirida
harakatlanadi,
sorbentning tezligini nayning pastki qismidagi kran yordamida boshqarish mumkin.
Ajratiladigan namuna kolonkaning yuqorigi qismidan kiritiladi. Uning harakati
davomida moddalar ajrala boradi. Turli vaqt oralig ‘ida tahlil uchun elyuyent olinadi
va u biror usul yordamida tekshiriladi. Keyingi
davrda asboblar takomillashib, bu
usul yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasig'd aylandi va hozirgi vaqtda organik
moddalar tahlilida asosiy usullardan bin bo‘lib qoldi. Bu usulda zanglamaydigan
po‘latdan yasalgan, diametri 2-6 mm, uzunligi 10-25 sm va undan ko‘proq bo‘lgan
kolonka o'lchami 3,5-10 mkm sorbent bilan to‘ldiriladi.
Detektor sifatida
sezuvchanligi yuqori spektrofotometrlar ishlatiladi (ular 10 ю M moddani
aniqlashga imkon beradi). Turg'un faza sifatida
harakatchan faza bilan
aralashmaydigan, mexanik va kimyoviy barqaror,
yetarli selektivlik va
samaradorlikka ega silikagel (silikat kislota ivig‘i - Si02xH20), alyuminiy oksidi va
boshqalardan foydalaniladi.