1-amaliy mashg’ulot hujayra va to’qima kulturasini olish usullarini o’zlashtirish Hujayra va to‘qimalar kulturasi

• 73-rasm Rekombinant DNK xosil bo’lishi

• 
  Plazmid vektorlari
  
• 
  • Plazmidlar avtonom vaziyatda qayta tiklashda, xromosomadan tashkarida ikkilangan ayol xalq deputatlari DNK. Plazmidlar deyarli barcha bakteriyalarda mavjud. Keyingi birlari o'zlarining bir xujayradan bo'shashganiga ko'chirishni ta'minlash bo'yicha axborotini (Fplazmidlar) tutadi, antiqaotiqlarga qarshi antibiotiklarga (R-plazmidlar) tutadi yo'q noananaviy metobolitlar utilizatsiyalashga javobgarlar spetsifikatsiyasini qabul qiluvchilarni qabul qilishda davom etayotganligi sababli. bulishi mumkin. Ularni har ikkala takrorlash saytini (ori) tutadi, ularsiz xujayrada plazmidalarni qayta ishlashni amalga oshirmaydi.
  
• 
  • A. pBR322 plazmidining genetik xaritasi. Tetratsiklinga (Tetr) va ampitsillinga (Amrr) chidamlilik ho'l kiluvchi gen HindIII, SalI, BamHI i PstI uchun yagona saytlar joylashtiriladi. EcoRI-sayt bu genlardan tashkarida yo'q qilingan. Vektorning uzunligi - 4361 j. n. B. pBR322 plazmidininggelektron mikroskopidagi ko'rinishi.
  

10-AMALIY MASHG’ULOT
DNK restriksion tahlil usuli.
Restriksiya endonukleazalari, restriktaza fermentlari - ko'pgina prokaryotik (bakteriyalar va ko'k-yashil suv o'tlari) va boshqa ba'zi organizmlarda begona DNKning fosfodiester bog'lanishlari gidrolizini katalizlaydigan gidrolazlar sinfiga kiruvchi fermentlar guruhi va shu bilan "immun" funktsiyasini bajaradi - cheklash-o'zgartirish tizimlari.
Restriksion endonukleazalar (yoki restriktiv fermentlar, lotincha restrictio - cheklash) - bu nuklein kislotalarning gidrolizlanish reaktsiyasini katalizlovchi gidrolazalar sinfiga kiruvchi fermentlar guruhi.
Eksonukleazalardan farqli o'laroq, restrikt fermentlari nuklein kislotalarni molekulaning oxiridan emas, balki o'rtasidan ajratib turadi. Bunday holda, har bir restriksiyon fermenti to'rt nukleotid jufti bo'lgan ma'lum bir DNK segmentini taniydi va tanib olish joyi ichidagi yoki uning tashqarisidagi nukleotid zanjirini uzib tashlaydi.
Bu ikki zanjirli DNKdagi ma'lum ketma-ketlikni "tan oladigan" fermentlar. Ular asosan prokaryotik hujayralardan ajratilgan.
Eksonukleazalardan farqli o'laroq, restriksiyon fermentlari endonukleazalar nuklein kislotalarni molekulaning oxiridan emas, balki o'rtasidan ajratib turadi. Shu bilan birga, har bir restriksiyon fermenti to'rt nukleotid jufti bo'lgan ma'lum bir DNK segmentini taniydi va tanib olish joyi ichidagi yoki uning tashqarisidagi nukleotid zanjirini uzib tashlaydi. 2007 yilga kelib uch mingdan ortiq cheklovli endonukleazalar ajratib olindi. Mingdan ortiq cheklash fermentlari tijorat maqsadida mavjud va laboratoriyalarda DNKni o'zgartirish va gen muhandisligi muammolarini hal qilish uchun muntazam ravishda foydalaniladi.