1-amaliy mashg’ulot hujayra va to’qima kulturasini olish usullarini o’zlashtirish Hujayra va to‘qimalar kulturasi

66-rasm Bir hil ishchilikka ega «yepishqoq» uchli fragmentlarni birlashtirib usuli.

Keyingi reestraktazalar, masala EcoRI, DNK zanjirida tanib bo'linadigan sayt markazidan bir hil masofada zina hosildorligi, simmetrik ko'rinishi paydo bo'ldi. Bu bir-biriga to'liq komplektlar uchastkalari asoslarini jiftlashishi moslamaga yo'qi «yepishqoq» uchlari orkali birlashish tendentsiyasiga ega bo''ldi.

67-rasm rekombinant DNK olish jarayoni

Bir hil izchillikka ega DNK fragmentlarini «yepishqoq» uchlari orkali birlashtirasiz.

• 
  Asoslarning jug'lashishi faqatgina komplektlari bajarilishi kerak, bu erda EcoRI ta'sirida paydo bo'lgan AATT-uchlari masalan Hind III tomonidan hosil qilingan AGGTT-uchlari bilan ta'minlanadi. Lekin bir restraktaza ta'sirida hosil qilingan har qanday DNK buloqlari (keltirilgan chiqishdan qat'iy nazar) komplementar nukleotidlarning bir zanjirli uchastkalari orasida vodorod boglari hosil kilish xususiyatiga birlashtirilishi mumkin.
  
• 
  Lekin bunday jiftlashishdan keyin ham DNK kuch zanjirining butunligi tuligiga tiklanmaydi va fosfodiefir bogida ikkita uzilib qolmoqda. Ularni tikish, yangi tikish ikki ligilashish uchun DNK ligazadan foydalanish. Rekombinant molekulalar hosil qilish ishlarini ligaza fermani yoqib qo'ydi.68-rasm Тўмтоқ» учли фрагментларни бирлаштириш усули.
  

69-rasm Тўмтоқ» учли фрагментларни qirqish усули.

• 
  Restriktsiya sayti ichida tugri uzish (qaychi sinari shartta ikki bulka buladi) hosildorlik kiluvchi restraktazalar ta'sirida «tuhtok» DNK fragmentlari paydo buladi, ularni ham DNK-ligaza fermani yordami bilan biriktirilishi mumkin. Bunday xollarda ligirlash reaktsiyasi uziga xos bolib, uning samara darajasi «yepishqoq» uchlarini birlashtirishga nisbatan bir oz pastroq. Ammo "tumtok" uchli fragmentlar birlashishining "yopishqoq" uchli fragmentlarini birlashtirishga nisbatan ko'paytirilganligi, "tumtok" uchli bu fragmentlar qayti restriktaza ta'sirida paydo bo'lgan bulyondan qat'iy nazar, turli restraktazalar tomonidan hosil ishlab chiqarilgan qismlar.