Spektrofotometrik tadqiqot bosqichlari: 1) spektrofotometrik tahlilni o'tkazish uchun qulay bo'lgan tizimlarni olish uchun kimyoviy reaktsiyani o'tkazish;
2) olingan eritmalarning yutilishini o'lchash.
Spektrofotometriya usulining mohiyati Modda eritmasining yutilishining to'lqin uzunligiga bog'liqligi grafikda moddaning yutilish spektri ko'rinishida tasvirlangan, bunda maksimal so'rilgan yorug'lik to'lqin uzunligida joylashgan yutilish maksimalini ajratish oson. modda bo'yicha. Spektrofotometrlarda moddalar eritmalarining optik zichligini o'lchash maksimal yutilish to'lqin uzunligida amalga oshiriladi. Bu yutilish maksimallari turli to'lqin uzunliklarida joylashgan moddalarni bitta eritmada tahlil qilish imkonini beradi.
Ultrabinafsha va ko'rinadigan spektrofotometriyada elektron yutilish spektrlari qo'llaniladi.
Ular cheklangan miqdordagi birikmalar va funktsional guruhlarga qodir bo'lgan eng yuqori energiya o'tishlarini tavsiflaydi. Noorganik birikmalarda elektron spektrlar moddaning molekulasidagi atomlarning yuqori polarizatsiyasi bilan bog'liq bo'lib, odatda kompleks birikmalarda paydo bo'ladi. Organik birikmalarda elektron spektrlarning paydo bo'lishi elektronlarning erdan qo'zg'aluvchan darajalarga o'tishi natijasida yuzaga keladi.
Yutish zonalarining holati va intensivligiga ionlanish kuchli ta'sir qiladi. Kislota turi bo'yicha ionlanish jarayonida molekulada qo'shimcha yolg'iz elektronlar juftligi paydo bo'ladi, bu qo'shimcha batokromik siljish (spektrning uzun to'lqin uzunligi hududiga siljishi) va yutilish zonasi intensivligining oshishiga olib keladi.
Ko'pgina moddalarning spektri bir nechta yutilish zonalarini o'z ichiga oladi.
Ultrabinafsha va ko'rinadigan hududlarda spektrofotometrik o'lchovlar uchun ikki turdagi asboblar qo'llaniladi - ro'yxatdan o'tmaslik(natija vizual ravishda qurilma miqyosida kuzatiladi) va spektrofotometrlarni yozib olish. Luminescent tahlil usuli. Luminesans- turli ta'sirlar ostida yuzaga keladigan o'z-o'zidan porlash qobiliyati.
Lyuminesansni keltirib chiqaradigan jarayonlarning tasnifi: 1) fotoluminesans (ko'rinadigan yoki ultrabinafsha nurlar bilan qo'zg'alish);
2) xemiluminesans (kimyoviy reaksiyalar energiyasi hisobiga qo'zg'alish);
3) katodolyuminesans (elektron zarba qo'zg'alishi);
4) termoluminesans (isitish orqali qo'zg'alish);
5) tribolyuminesans (mexanik ta'sir bilan qo'zg'alish).
Birinchi ikki turdagi lyuminestsent kimyoviy analizda muhim ahamiyatga ega.
Yorug'likdan keyingi yorug'likning mavjudligi bo'yicha lyuminessensiyaning tasnifi. U hayajon yo'qolganda darhol to'xtashi mumkin - floresans yoki ogohlantiruvchi ta'sir tugaganidan keyin ma'lum vaqt davom etishi - fosforessensiya. Floresan fenomeni asosan ishlatiladi, shuning uchun usul deyiladi florimetriya. Ftorometriyani qo'llash: metallar, organik (aromatik) birikmalar, vitaminlar izlarini tahlil qilish D, B 6. Loyqa yoki toʻq rangli muhitda titrlash uchun lyuminestsent indikatorlar qoʻllaniladi (titrlash qorongʻuda, indikator qoʻshilgan titrlangan eritmani lyuminestsent chiroq nurida yoritib oʻtkaziladi).
Nefelometrik tahlil. Nefelometriya 1912 yilda F. Kober tomonidan taklif qilingan va fotoelementlar yordamida zarrachalar suspenziyasi orqali tarqalgan yorug'lik intensivligini o'lchashga asoslangan.
Nefelometriya yordamida suvda erimaydigan, lekin barqaror suspenziyalar hosil qiluvchi moddalarning konsentratsiyasi o'lchanadi.
Nefelometrik o'lchovlarni amalga oshirish uchun ishlatiladi nefelometrlar, printsipial jihatdan kolorimetrlarga o'xshash, faqat nefelometriyadan farq qiladi
O'tkazishda fotonefelometrik tahlil birinchi navbatda standart eritmalar seriyasini aniqlash natijalari asosida kalibrlash grafigi tuziladi, so'ngra tekshirilayotgan eritma tahlil qilinadi va grafikdan tahlil qilinadigan moddaning konsentratsiyasi aniqlanadi. Olingan suspenziyalarni barqarorlashtirish uchun himoya kolloid qo'shiladi - kraxmal, jelatin va boshqalar eritmasi.
