Учебное пособие по курсу «Медицинская биохимия» /Л. А. Ганеева, Л. И. Зайнуллин

Работа 16. Качественные реакции на витамины 
Для обнаружения витаминов в различных веществах или биологических 
жидкостях и определения их количества существуют качественные реакции, 
основанные на цветных реакциях, характерных для той или иной 
группировки, входящей в витамин. 
Реактивы и оборудование: 
Витаминные препараты: тиаминхлорид (кристаллический), тиамин (5 %), 
рибофлавин (0,025 %), никотиновая кислота (РР), пиридоксин (1 %), вита-мин 
Р (насыщенный раствор), аскорбиновая кислота (1 %), ретинол (0,05 % 
хлороформный­ раствор), 0,05 % хлороформный раствор витамина D, рыбий 
жир, 0,1 % спиртовой раствор α-токоферола, 0,1 % спиртовой раствор ви-
касола; концентрированные кислоты: азотная, соляная, серная, уксусная; 
гидроксид калия (30 %), гексациано-III-феррат калия (10 %), нитрит натрия 
(5 %), металлический­ цинк, ацетат меди (5 %), гидрокарбонат натрия 
(10 %), гидросульфит натрия (свежеприготовленный 5 %), хлорид железа (III) 
(1 %), карбонат натрия­ (10 %), 0,01 % раствор йода в 0,2 % растворе йодида 
калия, трихлоруксусная сурьма (33 %), сульфат железа (II), насыщенный 
ледяной ук-сусной кислотой, раствор брома в хлороформе (1:60), 
изобутиловый спирт, соляная кислота­ (10 %), гидроксид натрия (10 %), 
тетраборат натрия (1 %), моча, сульфаниловая кислота (1 %), уксусная 
кислота (10 %), метиленовая синь (0,01 %), анилин, цистеин (0,025 %). 
Штативы с пробирками, пипетки на 1, 2 мл, термостат, флюорометр. 
Реакции на витамин B
1 
Тиамин имеет бициклическую природу, состоит из пиримидинового и тиа-
зольного кольца: 
В животных тканях тиамин (В
1
) присутствует главным образом в виде ко-
фермента — тиаминпирофосфата: 
Тиаминпирофосфат является коферментом декарбоксилаз кетокислот. 
Тиа-минпирофосфат катализирует также реакции переноса двухуглеродных 
фрагментов, будучи коферментом соответствующих ферментов. 
74 

---

Тиамин представляет собой мелкие бесцветные кристаллы горького вкуса, 
хорошо растворимые в воде. Растворы его в кислой среде устойчивы и выдер­ 
живают нагревание до высоких температур. В нейтральной и щелочной среде 
тиамин быстро разрушается. 
При авитаминозе тиамина развивается заболевание, получившее название 
полиневрит. Кроме человека, заболеванию подвержены птицы, кролики, со-
баки, крысы, морские свинки и многие другие животные. 
А. Реакция окисления 
В щелочной среде тиамин окисляется под действием гексациано-III-
феррата калия в тиохром — пигмент желтого цвета, который в изобутиловом 
спирте дает интенсивно синюю флюоресценцию: