Учебное пособие / А. И. Жебентяев. Витебск: вгму,2014

6.8.
 
Методы денитрации
После минерализации биологического материала любым из 
перечисленных методов минерализат содержит окислители, которые 
мешают дальнейшему проведению исследования. Жидкость, 
полученная после минерализации с помощью H
2
SO
4
и HNO
3
, как 
правило, содержит оксиды азота, азотную, азотистую, серную кислоты 
и нитрозилсульфат. Если каплю холодного минерализата смешать с 
раствором дифениламина в серной кислоте, образуется синее 
окрашивание, указывающее на наличие окислителя в минерализате. 
Для удаления оксидов азота из минерализата применяется 2 способа:
 
1
.Термический 
(гидролизный) 
способ
: 
минерализат 
в 
фарфоровой чашке разбавляют в 5–10 раз дистиллированной водой и 
упаривают его до появления на поверхности жидкости тяжелых белых 
паров триоксида серы. Жидкость проверяют с раствором 
дифениламина, если есть посинение, первоначальную операцию 
повторяют снова, т.е. пока дифениламин не покажет, что оксиды азота 
133 

---

Глава 6. Вещества, изолируемые методом минерализации 
_______________________________________________________ 
полностью не удалены из минерализата. Удаление оксидов азота из 
минерализата термическим способом требует затраты нескольких часов 
(15–
17), т.к. в минерализате, в результате взаимодействия оксидов 
азота с H
2
SO
4
, образуется нитрозилсульфат (нитрозилсерная кислота), 
устойчивая к термическим воздействиям. 
4HNO
3
→
4NO
2
+ O
2
+ 2H
2
O (6.8) 
2NO
2
+ H
2
SO
4
→
HSO
4
NO +HNO
3
(6.9)
Нитрозилсерная кислота способна гидролизоваться с 
образованием серной и азотистой кислот. С повышением температуры 
степень гидролиза нитрозилсерной кислоты увеличивается. Если в 
процессе гидролиза удалять азотистую кислоту, то степень гидролиза 
нитрозилсульфата также увеличивается. 
HSO
4 
NO + H
2
O HNO
2 
+ H
2
SO
4
(6.10) 
Большая часть оксидов азота при гидролизном методе 
удаляется в первый час денитрации, остальная часть удаляется 
медленно, то есть удаление азотистой кислоты в виде оксидов по этому 
способу идет медленно. 
2. 
Денитрация с применением восстановителей. 
При дальнейших исследованиях по совершенствованию методов 
денитрации было установлено, что для этой цели можно использовать 
восстановители (формальдегид, мочевину, сульфит натрия). 
Денитрация с помощью этих веществ основана на гидролизе 
нитрозилсерной кислоты и восстановлении азотистой кислоты 
(продукта гидролиза нитрозилсерной кислоты) до легко удаляемых из 
жидкостей оксида азота (NO) и элементарного азота (N
2
).
Денитрация минерализата с применением формальдегида. 
К минерализату прибавляют 10–15 мл дистиллированной воды и 
смесь нагревают. В нагретую жидкость, осторожно, по каплям, избегая 
избытка, вносят формалин. Наблюдается бурное выделение пузырьков 
газа (NO и N
2
) и, вследствие окисления NO кислородом воздуха, 
выделяются бурые пары NO
2
. Удобство применения формальдегида в 
том, что он, как восстановитель, взаимодействует и с HNO
2
, 
полученной при гидролизе нитрозилсерной кислоты, и с HNO
3
, 
содержащейся в минерализате в избытке. 
4HNO
3
+ 3CH
2
O → 3CO
2
+ 4NO + 5H
2
O (6.11) 
4HNO
2
+ 2CH
2
O → 2NO + N
2
+ 2CO
2 
+ 4 H
2
O (6.12) 
2NO + 2O
2
→ 2NO
2
(6.13) 
134 

---