Учебная литература медицинских вузов для студентов

Задание студентам
Протоколировать и оценить результаты развернутых ре­акций агглютинации, поставленных с парными сыво­ротками крови человека, иммунизированного бактериальной вакциной. Оценить эффективность вакцинации.
Протоколировать и оценить результаты РСК, постав­ленных с парными сыворотками крови человека, им­мунизированного вирусной вакциной. Оценить эф­фективность вакцинации.
Протоколировать и оценить результаты РСК, постав­ленной с сывороткой крови больного с бактериальной инфекцией для дифференциации первичной инфек­ции и рецидива.
Методические указания
1. Реакция торможения миграции лейкоцитов. В основе дан­ного метода лежит способность лимфоцитов после повтор­ного контакта с антигеном, к которому они были ранее
сенсибилизированы, продуцировать различные лимфокины, в том числе влияющие на миграцию индикаторных клеток (гранулоциты, моноциты, макрофаги). Реакция торможе­ния миграции лейкоцитов (РТМЛ) периферической крови в присутствии причинного антигена позволяет выявить специфическую сенсибилизацию Т-лимфоцитов. РТМЛ ставят в ка­пиллярах или под слоем агарозы. Проводят инкубацию лейко­цитов крови в присутствии и в отсутствие причинного мик­робного антигена, после чего измеряют зоны миграции (в про­центах) в присутствии антигена по сравнению с контролем, принятым за 100 %.
В случае выявления сенсибилизации к антигену на­блюдается торможение миграции лейкоцитов (индекс ниже 100 %).
2. Постановка и оценка кожно-аллергической пробы. Для вы­явления специфической сенсибилизации (при туберкулезе, бруцеллезе и других инфекционных заболеваниях) ставят кожно-аллергические пробы. Например, при постановке про­бы Манту внутрикожно вводят раствор туберкулина опреде­ленной концентрации. Реакцию учитывают через 24—48 ч, оценивая степень выраженности гиперемии и инфильтрат вокруг места введения (рис. 10.4.1; на вклейке). В основе положительной кожной пробы лежит клеточная реакция гиперчувствительности замедленного типа, которая отражает специфическую сенсибилизацию организма к данно­му инфекционному аллергену. Она возникает в результате те­кущего, перенесенного заболевания, вакцинации или инфици­рования организма.
3. Выявление нарастания титра антител в серологических ре­акциях с парными сыворотками больного или вакцинированного. Показателем развития гуморального иммунного ответа являет­ся нарастание титра специфических антител в сыво­ротке крови в течение 3—4 нед после инфицирования или вакцинирования. Это устанавливается в реакции с парными сыворотками, т.е. сыворотками, полученными от одного и того же человека в динамике инфекционного или вакцинального про­цесса (например, на 1-й и 3—4-й неделе). Появление антител в сыворотке человека, у которого ранее этих антител не было, называется сероконверсией. Диагностическое значение прида­ется, как правило, 4-кратному и более увеличению титра анти­тел.
При бактериальных инфекциях или вакцинации бактери­альными вакцинами с парными сыворотками ставят реакции агглютинации, РИГА или РСК (табл. 10.4.1).
Таблица 10.4.1. Результаты развернутой реакции агглютинации с бак­териальным диагностикумом и парными сыворотками человека, вакци­нированного бактериальной вакциной

Сроки взятия крови	Разведения сыворотки					Конт­роль сы­воротки	Конт­роль диа-гности-кума
	1:50	1:100	1:200	1:400	1:800

До вакцинации ++
Через 3 нед после +++ вакцинации
При вирусных инфекциях или вакцинации вирусными вак­цинами с парными сыворотками ставят РСК, РТГА и реакцию нейтрализации вирусов (табл. 10.4.2).
Нарастание титра антитоксических антител контролируют с помощью реакции флоккуляции или нейтрализации токсина.

Сроки взятия Разведения сыворотки Конт- Конт- крови 1 1 1 1 роль сы- роль диа- 1:10 1:20 1:40 1:80 1:160 воротки гности- кума В самом начале + + — — — — — эпидемии Через месяц после + + + + — — — начала эпидемии

Исследуе- Разведения сыворотки мая сыво- 1 1 1 1 1 1 1 ротка 1:юо 1:200 1:300 1:400 1:500 1:600 1:700 1:800 1:1000 После об- + + + ______ работки 2МЕ Без обра- + + + + + + + + + ботки 2 ME

воротке в результате обработки 2-меркаптоэтанолом свидетель­ствует в пользу первичной инфекции.
Для определения принадлежности специфических антител к определенному классу (изотипу) иммуноглобулинов исполь­зуют также твердофазный иммуноферментный метод. Специ­фический антиген фиксируется на поверхности лунок планше­тов из полистирола и инкубируется с исследуемой сывороткой. После отмывания от несвязанных иммобилизованным антиге­ном белков сыворотки связанные антитела-иммуноглобулины идентифицируются с помощью антиизотипической антиглобу-линовой сыворотки или соответствующих МКАТ. Их связыва­ние в свою очередь устанавливается с помощью антииммуно-глобулиновой сыворотки с ковалентно прикрепленным фер­ментом.