|
2.1.2 Adsorbsion xromatografiyaning foydalanishni cheklovchi kamchiliklari
HPLC usuli rivojlanishi bilan adsorbsion xromatografiyaning mashhurligi asta-sekin pasayib ketdi, u tobora ko'proq almashtirildi va bog'langan fazali sorbentlar bo'yicha teskari fazali va normal fazali HPLC kabi boshqa variantlar bilan almashtirilishi davom etmoqda. Adsorbsion xromatografiyaning qanday kamchiliklari bunga olib keldi?
Avvalo, bu adsorbentlarni iz miqdorida suv bo'lgan erituvchilar bilan muvozanatlash jarayonlarining uzoq davom etishi, ma'lum va takrorlanadigan namlik miqdori bilan bunday erituvchilarni tayyorlashning qiyinligi. Bu saqlanish, rezolyutsiya va selektivlik parametrlarining yomon takrorlanishiga olib keladi. Xuddi shu sababga ko'ra, gradient elyusiyasidan foydalanish mumkin emas - dastlabki holatga qaytish shunchalik uzoqki, u gradientdan foydalanish tufayli vaqt o'tishi bilan sezilarli darajada oshadi.
Adsorbentlarning, ayniqsa alyuminiy oksidining katalizga sezgir birikmalarning tez-tez qayta tashkil etilishi, ularning parchalanishi, qaytarilmas sorbsiyasi bilan bog'liq jiddiy kamchiliklari ham yaxshi ma'lum va adabiyotlarda bir necha bor qayd etilgan. Ustunning dastlabki qismida to'planib, sorbentning tabiatini o'zgartiradigan qaytarilmas adsorbsiya qiluvchi moddalar ustunning qarshiligini oshirishga yoki hatto uning to'liq tiqilib qolishiga olib kelishi mumkin. Oxirgi kamchilikni oldindan ustun yordamida yo'q qilish mumkin, bu esa on- qarshilik va tiqilib qolish ortishi bilan u yangi * bilan almashtiriladi yoki yangi sorbent bilan to'ldiriladi. Biroq, bu holatda ham sodir bo'ladigan qaytarilmas sorbsiya, sorbsiya yoki katalitik parchalanishga sezgir bo'lgan namuna komponentlari to'liq yoki qisman yo'q bo'lgan xromatogrammaga olib keladi.
2.2. TARQATISH XROMATOGRAFIYASI
Bo'linish xromatografiyasi HPLC variantidir, unda aralashmaning tarkibiy qismlarga bo'linishi ularning tarqalish koeffitsientlarining ikkita aralashmaydigan fazalar: erituvchi (mobil faza) va sorbentdagi faza (statsionar faza) o'rtasidagi farq tufayli amalga oshiriladi. Tarixiy jihatdan birinchi bo'lib gaz-suyuqlik xromatografiyasi (GLC) uchun sorbentlar qanday tayyorlangan va tayyorlanayotganiga o'xshash suyuqlik fazalarini (oksidipropionitril, kerosin moyi va boshqalar) g'ovak tashuvchilarga qo'llash orqali olingan ushbu turdagi sorbentlar birinchi bo'ldi. Biroq, bunday sorbentlarning kamchiliklari darhol aniqlandi, ularning asosiysi fazani tayanchdan nisbatan tez yuvish edi. Shu sababli ustundagi faza miqdori asta-sekin kamayib, ushlab turish vaqtlari ham qisqardi va ustunning boshlang'ich qismida faza bilan qoplanmagan adsorbsion markazlar paydo bo'ldi, bu esa tepalik quyruqlarining shakllanishiga olib keldi. Ushbu kamchilik hal qiluvchini ustunga kirishdan oldin qo'llab-quvvatlanadigan faza bilan to'yintirish orqali bartaraf etildi. Ko'proq yopishqoq va kamroq eriydigan polimer fazalari qo'llanilganda ko'chirish ham kamaydi, ammo bu holda, qalin polimer plyonkalardan diffuziya qilish qiyinligi sababli, ustunlarning samaradorligi sezilarli darajada kamaydi.
Suyuq fazani tashuvchiga kimyoviy bog'lar orqali payvand qilish, uning kirishi jismoniy imkonsiz bo'lib qoladigan tarzda, ya'ni tashuvchi va fazani bir butunga - payvandlangan fazaga aylantirish mantiqan to'g'ri keldi. sorbent.
Kelajakda tadqiqotchilarning sa'y-harakatlari reaktivlarni qidirishga qaratilgan bo'lib, ularni payvandlash juda tez va to'liq davom etadi va hosil bo'lgan aloqalar iloji boricha barqaror edi. Bu reagentlar alkilxlorosilanlar va ularning hosilalari bo'lib, shunga o'xshash texnologiyadan foydalangan holda sirtda har xil turdagi va turli qutbli va qutbsiz guruhlarga ega bo'lgan greft fazali sorbentlarni olish imkonini berdi.
HPLC uchun so'nggi turdagi sorbentlardan muvaffaqiyatli foydalanish turli ishlab chiqaruvchilar tomonidan ularni ishlab chiqarishning o'sishiga yordam berdi. Har bir kompaniya bunday sorbentlarni, qoida tariqasida, o'ziga xos silika jeli asosida va odatda ishlab chiqarishning "nou-xau" ni tashkil etadigan o'z texnologiyasiga muvofiq ishlab chiqaradi. Natijada, kimyoviy jihatdan aynan bir xil nomga ega bo'lgan ko'p miqdordagi sorbentlar (masalan, payvandlangan oktadesilsilanli silikagel) juda boshqacha xromatografik xususiyatlarga ega. Buning sababi, silikagelning teshiklari kengroq yoki torroq bo'lishi mumkin, turli sirt, g'ovaklik, payvandlashdan oldin uning yuzasi gidroksillangan yoki yo'q, mono-, di- yoki triklorosilanlarni payvand qilishi mumkin, payvandlash sharoitlari monomer, polimer yoki aralash fazali qatlam, qoldiq reagentlarni olib tashlashning turli usullari qo'llaniladi, silanol va boshqa faol guruhlarning qo'shimcha deaktivatsiyasi qo'llanilishi yoki qo'llanilmasligi mumkin.
Reagentlarni payvandlash va xom ashyo va materiallarni tayyorlash texnologiyasining murakkabligi, uning ko'p bosqichli tabiati, hatto bir ishlab chiqaruvchidan bir xil texnologiyadan foydalangan holda olingan sorbentlarning partiyalari ham bir oz boshqacha xromatografik xususiyatlarga ega bo'lishi mumkinligiga olib keladi. Bu, ayniqsa, bunday sorbentlar funktsional guruhlarning soni va joylashuvi va funksionallik turi bo'yicha sezilarli darajada farq qiluvchi moddalarni o'z ichiga olgan ko'p komponentli aralashmalarni tahlil qilish uchun qo'llaniladigan holatlar uchun to'g'ri keladi.
Yuqoridagilarni hisobga olgan holda, adabiyotda tavsiflangan tahlil usulidan foydalanganda aynan bir xil sorbent va bir xil ish sharoitlari qo'llanilishini ta'minlashga doimo intilish kerak. Bunday holda, asarni takrorlash mumkin emasligi ehtimoli minimaldir. Agar buning iloji bo'lmasa va shunga o'xshash bog'langan fazaga ega bo'lgan boshqa kompaniyadan sorbent olinsa, texnikani qayta ishlash uchun uzoq vaqt ishlash talab qilinishiga tayyor bo'lish kerak. Shu bilan birga, uzoq vaqt ishlab chiqilgandan keyin ham ushbu sorbentda kerakli ajratishga erishilmasligi ehtimoli mavjud (va buni hisobga olish kerak). Adabiyotda uzoq vaqt ishlab chiqarilgan eski sorbentlar bo'yicha ko'plab tasvirlangan ajratish protseduralarining mavjudligi ularni keyingi ishlab chiqarish va shu sababli foydalanishni rag'batlantiradi. Biroq, asl usullarni ishlab chiqishga o'tish zarur bo'lgan hollarda, ayniqsa parchalanish, kimyosorbsiya va qayta joylashishga moyil bo'lgan moddalarga nisbatan, yaqinda ishlab chiqilgan va yangi ishlab chiqarilgan sorbentlar ustida ishlashni boshlash tavsiya etiladi. , texnologiyaning takomillashtirilgan versiyalari. Yangi sorbentlar bir xil fraksiyonel tarkibga ega, sirtni bog'langan faza bilan bir xil va to'liq qoplash va sorbentni qayta ishlashning yanada rivojlangan yakuniy bosqichlari mavjud.
Do'stlaringiz bilan baham: |
