Muhandislik qilingan oqsil-oqsil kompleksining strukturasini aniqlash va termodinamik stabilizatsiyasi

Z:ZSPA-1 kompleksining termodinamik stabilizatsiyasi
sisteinni almashtirish uchun qoldiqlar
9.2 -rasm ning tasma chizmasi
Z:ZSPA-1 kompleksi tanlangan
9.3 Sistein-mutantning biofizik xususiyatlari 3: F5C/S39C
multimerik shakllar (ma'lumotlar ko'rsatilmagan). Elyusiya profili kichikroq assimetrik tepalikni ko'rsatadi
Mass-spektrometriya monomerda disulfid ko'prigi hosil bo'lishini tekshirish uchun muvaffaqiyatli ishlatilgan
pasaytirilgan va oksidlangan holat o'rtasidagi molekulyar og'irlikdagi farqni o'lchash orqali hosil bo'ladi;
oqsil. Mutant 3: F5C/S39C ning a-spiral tarkibi oksidlanishda ZSPA-1 ga o'xshaydi.
kamaytirmaydigan shartlar (ma'lumotlar ko'rsatilmagan).
49
Jel filtrlash dominant monomerik fraktsiyani oksidlangan dimerdan ajratish uchun ishlatilgan va
Spiral tarkib va termal barqarorlik CD orqali oksidlangan va qaytarilgan holda tahlil qilindi
gelfiltratsiya SDS-PAGE gelida faqat bitta bandni kamaytirish va kamaytirish ostida ko'rish mumkin edi
10 ºC da sodir bo'lgan sezilarli termal ochilish oqibati (9.3-rasm)
oqsillarning 40%.
saqlanish hajmi kutilganidan ko'ra, bu ZSPA-1 uchun tavsiflanganidek, o'z-o'zidan assotsiatsiyani ko'rsatadi. Keyin
10 ºC haroratda. Qaytaruvchi sharoitda spiral tarkibi pastroq bo'ladi, bu qisman a
2 Da ga to'g'ri keladi (ma'lumotlar ko'rsatilmagan). Qayta etilmagan N-terminal metionin 20-da mavjud edi.
ZSPA-1 (ko'k) rangda ko'rsatilgan.
Machine Translated by Google

---

Z:ZSPA-1 kompleksining termodinamik stabilizatsiyasi
10000
210
220
0
-20 000
230
240
-10 000
250
mut 2
mut 4
mut 5
mut 3
mut 1
Zstar
To'lqin uzunligi (nm)
mut 3
mut 5
mut 2
mut 4
Zstar
mut 1
B) 1 bilan qisqartirish sharoitida
mM TCEP qo'shildi.
A) Havoning oksidlanish sharoitida.