“биология”

49 
5-расм. 
CRISPR/Cas9 тизимлари элементларини экспрессияловчи генетик конструкция схемаси.
hCas9 – эукариот хужайраларда экспрессия қилиш учун оптималлаштирилган Cas9 оқсилининг 
кетма-кетлиги. sgRNA- фаол бўлиш учун crRNA ва tracrRNA қисмаларини ўзида тутган ягона 
химерик РНК. NLS – ядро локализацияси сигнали, унинг вазифаси конструкцияларни ядрога 
тушишини таъминлашдан иборат. Поли (А) – полиаденилланиш сигнали.
 
Одам, сичқон ва бошқа организмлар хужайра культураларининг 
трансформацияси учун кўпинча плазмидалардан фойдаланилади, бу 
плазмидалар cas9 ва in vitro sgRNA нуклеазаларнинг ишлаб чиқарилишини 
таъминлайди. Бутун организм трансформацияси учун Сas9 мРНК ларига ва 
бир хужайрали эмбрионларнинг sgRNA ларига микроинъекция махсус 
усуллари ишлаб чиқилган. Бу усул сичқон, данио (Danio rerio) ва 
дрозофилаларда фаол қўлланилади. Кенг қамровдаги ген нокаути учун 
sgRNAларнинг катта кутубхоналаридан фойдаланиб лентивирус векторлар 
қўлланилади. Хужайралари зич хужайра деворига эга ўсимликларда 
протопластларнинг плазмида трансформация усули ҳамда Agrobacterium 
tumefacients ёрдамидаги агроинфильтрация усули қўлланилади. 
1.3.
 
Геном мухандислигида TALEN ва CRISPR/Cas қўлланилиши. 
TALEN 
ва 
CRISPR/Cas9 
тизимларини 
яратиш 
геном 
мухандислигининг ривожланишида муҳим босқичлардан ҳисобланади. Бу 
тизимларнинг яратилиши, уларнинг арзон ва содда тузилиши фундаментал ва 
шу қаторда амалий фанларнинг ривожланишига кучли туртки берди. Бу 
технологияларни озиқ-овқат, қишлоқ хўжалиги ва тиббиёт каби турли 
соҳаларда қўлланилиши ҳақиқатдан ҳам ҳайратланарли ютуқларга сабаб 
бўлмоқда. 

---

50 
Нуклеаза 
Объект 
Ген