54
ферментлар (ДНК-метилтрансферазалар)
билан бир комплексда
таъсир кўрсатади. Модификацияловчи ферментлар рестриктазалар
билан биргаликда таъсир кўрсатувчи бир хил сайтларга спецификлик
хусусиятига эга. Кесиш ўрнига улар ДНКнинг ҳар бир занжиридаги
асослардан бирини метилирлайди. Метил гуруҳлари боғлаш
сайтидаги ДНК етакчи занжирига қўшилади ва рестриктаза таъсирига
монеълик қилади. Рестриктазалар модификацияловчи ферментларлар
билан биргаликда рестрикция-модификация тизимини (Р-М тизими)
шакллантирадилар. Баъзи Р-М
тизимларда рестриктаза ва
метилтрансфераза бир-биридан ажралиб туради ва бир-биридан
боғлиқ бўлмаган ҳолда таъсир кўрсатади. Бошқа
тизимларда эса улар
битта катта комплекснинг турли хил суббирликлари сифатида намоён
бўлади.
Рестриктазалар типлари
Классик тасниф бўйича рестриктазалар базавий суббирлик,
рестрикция сайти, спецификлик сайти ва кофакторга талаблар билан
боғлиқ ҳолда 4 типга бўлинади. Бироқ, рестриктазаларнинг
аминокислота
таркибини
ўрганиш
молекуляр
даражада
ферментларнинг анчагина кўп турли хил типлари мавжуд эканлигини
кўрсатди.
I типдаги рестриктазаларга бир нечта суббирликлардан ташкил
топган
мураккаб рестриктазалар, ДНКни ўзининг рестрикция
сайтидан тасодифий масофада кесадиган Р-М тизимлар киради. I
типдаги ферментлар биокимёвий қизиқиш уйғотади, бироқ улар
алоҳида рестрикцион фрагментлар ёки гелда фарқлаш мумкин бўлган
паттернларни ишлаб чиқармаганликлари учун амалиётда кам
қўлланилади.
II типдаги ферментлар ДНКни ўз
рестрикция сайтлари
доирасида ёки унчалик узоқ бўлмаган жойда кесади. Улар алоҳида
рестрикцион фрагментлар ёки гелда фарқлаш мумкин бўлган
паттернларни ишлаб чиқарадилар. Бу лаборатория шароитида ДНКни
ўрганиш ёки генларни клонлашда қўлланиладиган ягона ферментлар
типидир. II типдаги ферментлар ўхшаш оқсилларнинг алоҳида
синфига ажратилмайди, у ҳар хил оқсиллар турларини ўзида
бирлаштиради. II типдаги рестриктазалар кўпинча аминокислота
таркибига кўра бир-биридан, шунингдек бошқа барча маълум бўлган
55
оқсиллардан фарқ қилади. Улар кўпинча паразит-хўжайин ўзаро
таъсирида муҳим роль ўйновчи оқсиллар синфларини намоён этади.
III
типдаги
ферментлар
шунингдек,
катта
оқсил
комплексларини намоён этади. Улар ДНКни ўз рестрикция
сайтларидан ташқарида кесади ва
уларга кесишни якунлаш учун
ДНКнинг бир молекуласи доирасида қарама-қарши йўналишли
иккита шундай сайт зарур бўлади.
IV
типдаги
ферментлар
модификацияланган,
одатда
метилирланган
ДНКни
аниқлайди,
ва
E.coli
нинг
McrBC ва Mrr тизимларини ифодалайди.
https://www.skygen.com/katalog/reagenty
Do'stlaringiz bilan baham: