Том 1
Ботаника в современном мире
11
Dewey D. R. 1984. The genomic system of classification as a guide to intergeneric hybridization
with the perennial
Triticeae
// Gustafson J. P. (ed.). Gene Manipulation in Plant Improvement. New York. P.
209–279.
Yen C., Yang J.-L., Baum B. R. 2009. Synopsis of
Leymus
Hochst. (Triticeae: Poaceae) // Journal of
Systematics and Evolution. Vol. 47(1). P. 67–86.
Molecular-phylogenetic study of species of the genus
Leymus
Höchst. (Poaceae) of Russia
Badmaeva N. K.
1
*, Tubanova D. Ya.
1
, Eshisambueva N. B.
2
, Agafonov A. V.
3
1
Ulan-Ude, Institute of General and Experimental Biology SD RAS
2
Ulan-Ude, Buryat State University
3
Novosibirsk, Central Siberian Botanical Garden SD RAS
*E-mail:
badmayevan@mail.ru
In the article we present the results of the study of taxonomic relationships among 18 species of the
genus
Leymus
(Hochst.) from different geographical points as inferred by sequencing of the nuclear riboso-
mal DNA internal transcribed spacer region ITS1-5.8S-ITS2 nDNA and MatK cpDNA.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДА ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ ПРИ ДИАГНОСТИКЕ
ВИДОВ РОДА
NITRARIA
Банаев Е. В.*, Томошевич М. А., Воронкова М. С.
Новосибирск, Центральный сибирский ботанический сад СО РАН
*E-mail: alnus2005@mail.ru
Одним из эффективных методов оценки размера генома является метод проточной цитомет-
рии (FCM), успешно применяемый в последние десятилетия для оценки генетического разнообразия
целого ряда растительных организмов. При всей простоте и надежности метода, одной из самых
сложных проблем, с которыми сталкиваются пользователи FCM, является корректировка буферной
композиции для видов, содержащих ингибиторы окрашивания, такие как фенолы, кофеин и другие
вторичные метаболиты в цитозоле их листовых клеток. Несмотря на наличие значительного количе-
ства исследований, до настоящего времени мало информации о способе действия ингибиторов окра-
шивания и нет универсального метода, чтобы полностью избежать их влияния на оценку содержания
ДНК в различных объектах (Loureiro et al., 2006; Greilhuber, 2008). В связи с этим для анализа размера
генома предлагается использовать, по возможности, органы растений, свободные от ингибиторов, в
частности, семена, которые имеют целый ряд преимуществ перед листовым материалом с точки зре-
ния доступности для исследования, легкости транспортировки, возможности длительного хранения.
При этом присутствие ингибиторов окрашивания следует проверять для каждого вида, особенно дре-
весного, независимо от растительного материала, используемого для измерения, а состав буферной
изоляции ядер должен быть оптимизирован для отдельных тканей или видов.
Растения рода
Nitraria
L. являются типичными галофитами и, обычно, приурочены к интразо-
нальным сообществам. Филогенетическая древность этого рода, формировавшегося, по мнению В.
Л. Комарова, еще ранее образования пояса пустынь Старого Света и Австралии по морским побере-
жьям Гондваны и незначительная морфологическая дифференциация видов до настоящего времени
не позволяют сделать выводы об их генезисе. Популяции многих видов
Nitraria
в значительной сте-
пени изолированы друг от друга, что делает этот род уникальным модельным объектом для исследо-
вания генетической дивергенции.
Цель работы – оценка особенностей использования листьев и семян
Nitraria
schoberi
L. для
определения размера генома методом проточной цитометрии.
В работе использовали семена, собранные в природных популяциях
N. schoberi
, а также ли-
стья растений, выращенных из семян в культуре
.
В качестве внутреннего стандарта применяли листья
Raphanus sativus
L. «Saxa»
32
(Doležel et al., 1992) (2С DNAcontent = 1,11 пг), выращенного из семян,
полученных из лаборатории молекулярной цитогенетики и цитометрии Института эксперименталь-
ной ботаники Академии наук Чехии.
Анализ проводили на приборе Cy Flow Space (Германия, Sysmex Partec) с лазерным источни-
ком излучения 532 нм. Окрашивание изолированных ядер проводили йодидом пропидия. Извлечен-
ный из семени зародыш (для семян) или свежий лист измельчали лезвием вместе с соответствующим
количеством внутреннего стандарта (
Raphanus sativus
L. «Saxa»
32
) в 500 мкл охлажденного буфера
Do'stlaringiz bilan baham: |