atomidagi fosfat kislota qoldig‘ ini qo‘ shni mononukleotid 2 ’-ugIerod
atomiga o‘tkazadi. Bu nukleotidlar oTtasidagi bogMarning uzilishi va
bir mononukleotidni o‘ziga riboza 2 ’- va 3’-uglerod atomlar oTtasida
fosfodiefir bog‘ i hosil bo‘ lishi bilan boradi.
Hozirgi vaqtda DNK va
RNKning parchalanishini katalizlovchi nukleazalar g ‘ruhi ochilgan.
Dezoksiribonukleaza I. DNK molekulasini bitta zanjiridagi
dezoksiriboza 3 ’ -uglerod atomi va fosfat qoldig‘ i o‘rtasidagi
ichki fosfodiefir bog‘ larning uzilishini katalizlaydi, natijada past
m olekulali oligodezoksiribonukleotidlar hosil boUadi:
DNK+ (n-l)H ,0
n-oligodezoksiribonukleotidlar
Reaksiya mahsulotlari orasida, shuningdek, mono-vadinukleotidlar
ham ochilgan. Oshqozon osti bezi DNKazasi bu fermentlaming
vakili bo‘ lib hisoblanadi. Ulardan biri (DNK-aza 1) toza holatda
ajratilgan, uning tarkibida 257 aminokislota
qoldiqlarining ketma-
ketligi aniqlangan. Ferment pH 6,8-8,0 da eng yuqori faolikka
ega bo‘ lib, 2 valentli M g*2 va Mn*2ionlari bilan faollashadi va
fermentativ reaksiyaning oxirgi mahsuloti boimish oligonukleotidlar
ta’sirida ingibirlanadi.
Dezoksiribonukleaza 11. DNK ikkala zanjiridagi ju ft fosfodiefir
bog‘ laming uzilishi natijasida yirik oligodezoksiribonukleotidlarni
hosil qiladi. Ularning vakili boiib,
taloqdan ajratilgan, m olekulyar
og‘ irligi 38000D, 343 aminokislota qoldig‘ idan tarkib topgan DNK-
aza II hisoblanadi. Bu DNK-aza tarkibida glyukozamin ochilgan.
Bu ferment ham metall ionlari bilan faollanadi, anionlar tomonidan
ingibirlanadi, pH 5,5 va 5,8 oraligida optimal.
Bu fermentlardan tashqari, yana (asosan, mikroorganizmlarda)
ekzodezoksiribonukleazalar ochilgan,
ular DNK molekulasidagi
fosfodiefir bogiarni gidrolizlab, oxirgi 5’ -dezoksiribonukleotidlami
ajratadi. Masalan,
E.Coli
dan shunday to‘rtta ferment ajratilgan
bo‘ lib, ular ekzodezoksiribonukleaza 1, II, III va IV deb belgilanadi.
Restriktazalar - nukleaza tipida ta’sir etuvchi fermentlar boiib,
begona (asosan, faglam i) DNKning palindrom strukturaga ega
molekuladagi aniq qism larining parchalanishini katalizlaydi.
E.Coli
dan 2 ta shunday restrikaza ajratilib, xususiyatlari o‘rganilgan va
EcoRI va EcoRII deb belgilangan. Restriktazalar aniq spesifik ta’sir
koisatadi, shuning uchun fag va viruslar
DNKsidagi nukleotid
qoldiqlari ketma-ketligini aniqlashda ulardan foydalaniladi. Bundan
241
tashqari, restriktazalarning bu xususiyati gen injeneriyasida
DNKning m a’ lum fragmentlarini «kesish» va ularni bakterial DNK
genomiga «kiritish »da (rekombinant DNKlarni olishda) am aliy
jihatdan kowp qo‘ llanilmoqda. Natijada hujayraga unga avval xos
bo‘ lm agan irsiy belgilar o‘tkaziladi. Ushbu
tekshiruvlarning nazariy
va am aliy qiym atini baholash qiyin.
RNKni gidrolitik parchalanishini katalizlovchi yaxshi o‘rganilgan
fermentlardan biri - ribonukleaza I dir. U RNK molekulasi ichki
fosfodiefir bog'larini gidrolizlaydi. Ko‘pincha hayvonlar oshqozon
osti bezidan ajratilgan RNK-azalar 124 aminokislota qoldig’ idan
tarkib topgan bo‘ lib, aminokislotalarning ketma-ket joylashishi bilan
farqlanadi; ba’zi RNK-azalaming uchlamchi strukturasi aniqlangan.
N ogidrolitikyo‘ l bilan DNK va RNKning parchalanishini am alga
oshiruvchi fermentlar sifatida polinukleotid-fosforilaza va DNK-
glikozidazalaini ko rsatish mumkin. S.S. Debov laboratoriyasida mik-
loblai polinukleotid-fosforilazasining fizik-kim yoviy xususiyatlari va
biologik vazifasi batafsil o‘rganilgan. Fermentning ta’sir mexanizmi
nukleotid qoldiqlarini RNKdan neorganik fosfatga o‘tkazilishidan
iborat, bunda ribonukleotiddifosfat (RDF) hosil bo‘ ladi:
RNK + H3PO. - » (RNK)n + RDF
Fement
in vivo
sharoitida hujayra RNKlarini, asosan mRNKni,
nu
leoziddifosfatlarga parchalab, hujayradagi noorganik fosfat miq-
otini oshqarishdaqatnashadi. Polinukleotid-fosforilazaningyanabir
muhim xususiyati
Do'stlaringiz bilan baham: