И. А. Касымов,Г. Т. Мардаева,Я. К. Худайбердиев Терминология и интерпретация лабораторных данных при вирусных

ВЕСТЕРН-БЛОТИНГ ИЛИ ИММУНОБЛОТИНГ
(Western blotting, immunoblotting) 
— современный высокочувствительный метод идентификации белков, 
в том числе вирусных антигенов. Метод основан на комбинации гель-
электрофореза и реакции антиген-антитело. Высокая степень разрешения 
достигается за счет электрофоретического разделения белков, глико- и 
липопротеинов и максимальной специфичностью детектирующих иммунных 
сывороток или моноклональных антител. В оптимально отработанных 
условиях иммуноблотингом можно обнаруживать антиген в количествах 
менее 1 нг в испытуемом объеме. Технически иммуноблотинг выполняется в 
три приема:
1) подлежащие анализу белки подвергаются разделению в 
полиакриламидном геле в присутствии денатурирующих веществ: 
додецилсульфата натрия или мочевины, этот процесс часто обозначают как 
SDS-
PAGE; разделенные белки могут визуализироваться после окрашивания 
и сравниваться с эталонными образцами;
2) разделенные белки переносятся с геля путем наложения (блотинга) 
на нитроцеллюлозный фильтр и фиксируются на нем; во многих случаях, но 
не всегда, при переносе сохраняются количественные соотношения белков;
3) на фильтры наносятся детектирующие поли- или моноклональные 
антитела, содержащие радиоизотопную или ферментную метку; для 
обнаружения связавшихся антител применяют также антивидовую меченую 

---

сыворотку, иными словами, на заключительном этане блотинг аналогичен 
твердофазным иммунологическим тестам.
Следует иметь в виду, что в данной постановке иммуноблотинга белки 
находятся в денатурированном состоянии, и поэтому могут не 
распознаваться антителами, специфическими по отношению к нативному 
белку, но зато при наличии сывороток ко всем составляющим пептидам 
одновременно выявляется весь антигенный спектр испытуемого белка. 
Иммуноблотинг достаточно широко используется в исследованиях строения 
вирусов гепатитов, в частности, для установления антигенного родства 
между отдельными штаммами. Высокая разрешающая способность 
иммуноблотинга позволяет получать хорошие результаты и в 
диагностической практике, когда требуется идентифицировать вирус в 
тканях или экскретах больного.