Universum: технические науки


Исследования острой токсичности экстрактов



Download 2,84 Mb.
Pdf ko'rish
bet6/106
Sana25.02.2022
Hajmi2,84 Mb.
#296868
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   106
Bog'liq
10(91 4)

Исследования острой токсичности экстрактов 
и плодов V.sativa, и V.villosa
Острая токсичность определялась путем скарм-
ливания измельченных плодов растений белым 
мышам из расчета 10 г/кг[3]. Плоды в смеси с хлебом 
вводились в течение четырех дней по 50 г (корма) на 
группу. В группах – по 5 мышей обоего пола. Мыши 
контрольной группы – средняя масса 21.0 г;
первая группа (
V.sativa
) – 21.6 г; вторая группа 
(
V.villosa
) – 20.4 г.


№ 10 (91)
октябрь, 2021 г. 

Через 4 дня введения препарата контрольная груп-
па набрала в массе 1.9 г – 9%; I группа – 4.1 г (19%), 
II группа – 6 г (29%). Мыши обоих групп имели 
опрятный вид и по двигательной активности не от-
личались от мышей контрольной группы.
В процессе исследований ежедневно проводи-
лись наблюдения общего состояния; поведение, 
употребление воды и корма, состояние шерстяного 
покрова, выделения кала и мочи и т.п.
Ограничений в двигательной активности в течение 
приема корма, а также признаков интоксикации и 
гибели подопытных мышей не наблюдали.
Таблица 2. 
Сравнительная оценка V. sativa и V.villosaс контрольной группой на изменение массы тела мышей 
Группы 
Исходная масса 
(средн.) 
Масса средняя 
через 4 дня 
Разница 
Разница (%) 
Контроль 
21.0 
22.9 
1.9 

I - (
V.sativa

21.6 
25.7 
4.1 
19 
II - (
V.villosa

20.4 
26.4 
6.0 
29 
Результаты изучения измельченных плодов 
V. sativa
и 
V.villosa 
показали, что острого токсического 
действия исследуемых растений выявлено не было. 
Высушенную надземную часть растений измель-
чали в ступке до однородного состояния, отбирали 
навески и экстрагировали в течение часа 0.2н NaOH 
(рН 9.0) в соотношении 1:30 с использованием на 
магнитной мешалки 500 об/мин.
Полученный 
экстракт 
центрифугировали 
на рефрижераторной центрифуге при скорости 
3000 об/мин. в течении 30 мин. Затем в полученном 
надосадочном растворе (супернатанте) проводили 
осаждение суммарного белка путем 60% насыщения 
раствора сухим сульфатом аммония (из расчета 
36.88 г (NH
4
)
2
SO
4
на 100 мл), добавляя его отдель-
ными порциями при перемешивании. Полученную 
белковую суспензию оставляли в холодильнике на 
24 ч для формирования полноценного белкового 
осадка. Затем, суспензию центрифугировали на ре-
фрижераторной центрифуге при 6000 об/мин. в тече-
ние 30 мин. Осадок собирали и растворяли в мини-
мальном объеме (20мл–30мл) 0.2н раствора NaOH [4]. 
Количественное содержание белка в получен-
ном растворе определяли спектрофотометрическим 
методом Калькара, путем измерения оптической 
плотности растворов на спектрофотометре СФ-46 в 
ультрафиолетовом диапазоне при длине волны 260 
и 280 нм [5].
В результате анализа было определено, что в го-
рохе кормовом содержится -4.8% белка, в надземной 
части 
V.sativa
– 6.4%, в 
V.villosa
– 8.8 % и 
V.angustifolia

7.2% белка.
Аминокислотный состав выделенных белков 
определяли после диализа полученных белковых 
растворов в проточной воде в течение 24 часов с ис-
пользованием полупроницаемых мембрандля удале-
ния низкомолекулярных компонентов с ММ ниже 
10 000 Да.
Обессоленные белковые растворы лиофильно 
высушивали и отбирали навески белка массой –50 мг.
Гидролиз проводили 5.7 н соляной кислотой при 
110
0
С в течение 24 часов в вакууме.
По окончании реакции гидролизаты упаривали 
и определяли аминокислотный состав на аминокис-
лотном анализаторе марки [6, 7]. Затем гидролизаты 
растворяли в определенном объеме буферного рас-
твора и наносили на хроматографическую колонку 
анализатора. 
Идентификацию и расчет аминокислот провели, 
предварительно проанализировав образцы стан-
дартных растворов аминокислот с известной кон-
центрацией. Содержание аминокислот С (нмоль) 
рассчитывали по площади пика, на основании по-
строения калибровочного графика стандартных 
растворов аминокислот.
Расчет количественного содержания каждой 
аминокислоты (%) проводили по следующей фор-
муле:
С =
С (нмоль) × ММ × 10
−4
m
× 𝑉р
С – концентрация каждой аминокислоты в выде-
ленном белке ( %), 
С (нмоль)–концентрация каждой аминокислоты, 
рассчитанная на основании площади пика амино-
кислоты по графику стандартных растворов амино-
кислот, выраженная в нмолях. 
ММ–молекулярная масса каждой аминокислоты, 
M–навеска белка анализируемого образца, взя-
тая для проведения кислотного гидролиза (мг).
Vр–объём буферного раствора гидролизата при 
нанесении на хроматографическую колонку амино-
кислотного анализатора (0.1–0.5 мл).


№ 10 (91)
октябрь, 2021 г. 


Download 2,84 Mb.

Do'stlaringiz bilan baham:
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   106




Ma'lumotlar bazasi mualliflik huquqi bilan himoyalangan ©hozir.org 2024
ma'muriyatiga murojaat qiling

kiriting | ro'yxatdan o'tish
    Bosh sahifa
юртда тантана
Боғда битган
Бугун юртда
Эшитганлар жилманглар
Эшитмадим деманглар
битган бодомлар
Yangiariq tumani
qitish marakazi
Raqamli texnologiyalar
ilishida muhokamadan
tasdiqqa tavsiya
tavsiya etilgan
iqtisodiyot kafedrasi
steiermarkischen landesregierung
asarlaringizni yuboring
o'zingizning asarlaringizni
Iltimos faqat
faqat o'zingizning
steierm rkischen
landesregierung fachabteilung
rkischen landesregierung
hamshira loyihasi
loyihasi mavsum
faolyatining oqibatlari
asosiy adabiyotlar
fakulteti ahborot
ahborot havfsizligi
havfsizligi kafedrasi
fanidan bo’yicha
fakulteti iqtisodiyot
boshqaruv fakulteti
chiqarishda boshqaruv
ishlab chiqarishda
iqtisodiyot fakultet
multiservis tarmoqlari
fanidan asosiy
Uzbek fanidan
mavzulari potok
asosidagi multiservis
'aliyyil a'ziym
billahil 'aliyyil
illaa billahil
quvvata illaa
falah' deganida
Kompyuter savodxonligi
bo’yicha mustaqil
'alal falah'
Hayya 'alal
'alas soloh
Hayya 'alas
mavsum boyicha


yuklab olish